[发明专利]一种CIK细胞体外培养方法无效
| 申请号： | 200310109565.5 | 申请日： | 2003-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN1552848A | 公开（公告）日： | 2004-12-08 |
| 发明（设计）人： | 谭文松;秦晓亮;蔡海波 | 申请（专利权）人： | 上海伯瑞生物技术发展有限公司;华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08;C12N5/02 |
| 代理公司： | 中原信达知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 罗大忱 |
| 地址： | 201203上海市浦东*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种CIK细胞体外培养方法。本发明在悬浮培养条件下，采用PHA和抗CD3单克隆抗体两种有丝分裂原联合激活细胞，增强对细胞的刺激强度，从而提高细胞的体外扩增能力，在细胞被激活后对有丝分裂原及细胞因子进行洗脱，避免由于有丝分裂原与细胞长期接触导致细胞受到过度刺激而发生凋亡。本发明在搅拌式生物反应器中体外诱导CIK细胞的扩增，可提供稳定均一的培养环境、培养过程中的重要参数(如溶氧、pH、代谢物浓度等)易于控制、操作简便、易于放大等优点。因而可提高CIK细胞的扩增倍数，细胞毒活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 cik 细胞 体外 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种CIK细胞体外培养方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将从新鲜脐血中分离出的单个核细胞，接种到搅拌式生物反应器中，接种密度为1×105cells/mL至2×106cells/mL，加入IFN-γ，20～30小时后加入IL-2和IL-1β，同时加入抗CD3 mAb、PHA、刺激2～5天；2)将激活后的细胞用培养基洗涤，然后将细胞以1×105cells/mL至1×106cells/mL的密度接种进搅拌式生物反应器中，进行悬浮搅拌培养。
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