[发明专利]一种用于发现肿瘤特异性抗原和肿瘤特异性抗原决定簇的高产率逆反免疫法

摘要

本发明公开了一种使用从病人身上收集的肿瘤样品和环周血液单核细胞(或肿瘤穿透淋巴细胞)来寻找有肿瘤特异性的、被某一人种肿瘤细胞上的特定HLA类受体呈献而且为CD4阳性淋巴细胞或CD8阳性淋巴细胞识别的、从一个特定的候选肿瘤抗原上获得的抗原决定簇的方法；本发明还公开一种用在细胞免疫疗法中使用的治疗疫苗或免疫原，以及从病人身上收集的肿瘤样品和环周血液单核细胞(或肿瘤穿透淋巴细胞)，来筛选细胞免疫疗法对特定种族的病人的潜在疗效的方法；本发明还公开了一种用体外扩增产生对抗原或抗原决定簇有特异反应性的T淋巴细胞，来进行细胞寄抚转移疗法，或研制治疗性疫苗以激活细胞免疫系统的方法。

主权项

1.一种使用从病人身上收集的肿瘤样品和环周血液单核细胞，寻找有肿瘤特异性的、被某一人种肿瘤细胞上的特定HLA类受体呈献、为CD4阳性淋巴细胞或CD8阳性淋巴细胞识别的、从一个特定的候选肿瘤抗原上获得的抗原决定簇的方法，该方法包括：a.建立一个表达所需的HLA受体种类的靶标细胞系，这些靶标细胞还表达候选肿瘤抗原基因或被候选多肽脉冲过；b.分析候选肿瘤抗原基因，预测现对应于这些特定的HLA受体种类的抗原决定簇的粘合序列，根据预测的粘合序列合成一系列的多肽；c.用这些多肽刺激从病人身上提取的环周血液单核细胞；d.把激活的环周血液单核细胞和靶标细胞共同培养，找出对多肽有反应性的T淋巴细胞；e.把对多肽有反应性的T淋巴细胞和从同一病人上所得的肿瘤细胞共同培养，找出对肿瘤有反应性的T淋巴细胞；f.当一个对多肽有反应性的T淋巴细胞克隆被证实可以识别肿瘤细胞，则证实该多肽为此HLA受体所呈献的有效的抗原决定簇。