[发明专利]一种快速获得大量转基因植物新品种的分子育种方法

摘要

本发明提供了一种快速获得大量转基因植物新品种的方法，按照本方法，使农杆菌转化后获得的抗性愈伤组织以体细胞胚发生途径分化形成再生苗。从而，大幅度提高了转基因苗的再生效率。通过在体细胞胚萌发和生长过程中添加目标抗性的筛选试剂，进行目标抗性植株的筛选，使目标抗性转基因苗的获得率大幅度提高，并减少了后期检测的工作量。利用该技术12周即可获得大量的目标抗性转基因苜蓿再生苗，满足当代进行大规模的生物学测定和优良株系的筛选的需要，结合田间试验，当代即可获得大量表型好的优良品系。该技术体系在饲草育种中具有显著的经济效益和社会效益。

主权项

1.一种快速获得大量转基因植物新品种的分子育种方法，包括(1)制备外植体；(2)所述外植体在含2.0mg/L 2，4-D和0.025mg/L激动素的MSH培养基上预培养之后，用含目标基因的农杆菌菌液侵染外植体，其中所述MSH培养基的基本组分包括SH大量元素，MS微量元素及铁盐，1-2mg/L水解酪蛋白，9.9mg/L VB1，9.5mg/L VB6，4.5mg/L尼克酸，8g/L琼脂和30g/L蔗糖；(3)在含除菌药剂浓度逐渐升高的选择压的所述培养基上筛选抗性愈伤组织并除去农杆菌；(4)在含0.3-0.6mg/L激动素和低浓度选择压的所述培养基上诱导愈伤组织体细胞胚；(5)体细胞胚萌发，并利用标记基因和目标基因所对应的药剂来筛选抗性转基因再生苗；(6)对转化后获得的抗性苗进行分子检测；(7)扩大繁殖抗性转基因再生苗；(8)对抗性转基因再生苗进行生物学鉴定，获得优良品系。