[发明专利]具有RNAi效应的茎环RNA分子的表达系统无效
申请号: | 03815095.6 | 申请日: | 2003-04-25 |
公开(公告)号: | CN1665930A | 公开(公告)日: | 2005-09-07 |
发明(设计)人: | 多比良和诚;川崎广明 | 申请(专利权)人: | 独立行政法人产业技术总合研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N5/10;C12N1/19;A01K67/027;C12Q1/02;C12Q1/68;A61K31/7088;A61K48/00 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 巫肖南;封新琴 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明发现通过利用tRNA启动子从编码茎环RNA分子的DNA中制备所述RNA分子,所述RNA分子可以被有效地转移到细胞质中,从而显示RNAi效应。所述RNAi效应也可通过将细胞质易位信号序列导入编码茎环RNA分子的DNA中而被有效地赋予。此外,所述RNAi效应可以通过使用polII型启动子将转录产物转移到细胞质中来有效地赋予。在这种情况下,细胞毒活性可通过共表达Dicer基因而被降低。此外,有效的dsRNA可以通过使用Dicer蛋白处理dsRNA或茎环RNA分子来构建。使用这些茎环RNA分子表达系统使得有可能方便地构建缺乏目的基因的剔除细胞。 | ||
搜索关键词: | 具有 rnai 效应 rna 分子 表达 系统 | ||
【主权项】:
1.编码在细胞内具有RNAi效应的茎环RNA分子的DNA,其中所述DNA包含(i)细胞质易位信号序列,和(ii)一种结构,其中(a)编码靶基因mRNA任一区的有义RNA的有义编码DNA,和(b)所述有义编码DNA的互补序列通过间隔区以相反的方向连接,并且所述DNA与启动子可操作地连接。
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