[发明专利]一种高效的聚乙二醇活化工艺及活化物的蛋白质修饰应用

摘要

本发明提供一种高效的聚乙二醇(PEG)末端羟基的活化工艺及其活化产物与蛋白质等带亲核基团的生物活性分子的修饰反应方法和反应产物。其特征是：(1)将PEG和甲苯加热到140℃共沸除去PEG中的水份。(2)无水PEG和2－氟－1－甲基吡啶鎓甲苯－4－磺酸盐在无水极性有机溶剂中进行反应。(3)反应过程中滴加有机碱维持pH在8－9。(4)用乙醚沉淀PEG活化产物，用异丙醇重结晶法纯化活化产物。(5)PEG活化产物在缓冲水溶液中与蛋白质等带有亲核基团的生物活性分子反应，得到PEG与该分子的偶联物。本发明提供的PEG的活化工艺具有产物活化率高(95％)，产物纯度高(99％)，修饰速度可控性好，修饰产物的化学稳定性好等特点。本发明的活化PEG尤其适用于多肽和蛋白质的修饰。

主权项

1.一种聚乙二醇(PEG)末端羟基的高效活化工艺，其特征在于：(1)利用水和甲苯在140℃共沸的性质将PEG溶解在甲苯中，然后加热到140℃共沸除去PEG中的水份(PEG水份含量＜50ppm)；(2)无水PEG和2-氟-1-甲基吡啶鎓甲苯-4-磺酸盐在无水的极性有机溶剂(水份含量＜50ppm)中进行反应；(3)反应过程中滴加叔胺或者吡啶等有机碱维持溶液的pH在8～9之间；(4)利用乙醚沉淀的方法分离PEG活化产物；利用异丙醇重结晶的方法纯化PEG活化产物。