[发明专利]长效重组组织因子途径抑制物及其制备方法有效
| 申请号： | 03151203.8 | 申请日： | 2003-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN1528894A | 公开（公告）日： | 2004-09-15 |
| 发明（设计）人： | 马端;宋后燕;白浩;张农 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/63 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 包兆宜 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术领域，具体涉及长效组织因子途径抑制物(LTFPI)及其制备方法和应用。本发明对组织因子途径抑制物(TFPI)及其受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的生物信息学和结构分子生物学分析和实验，确定了TFPI羧基末端与LRP结合并被清除的部位。设计了TFPI羧基末端突变体，通过PCR定点突变构建LTFPI基因后，与原核或真核表达载体重组，转化大肠杆菌或毕赤酵母，筛选高表达工程菌。原核工程菌经发酵扩增，破碎细菌，离心收集包涵体，复性后经分子筛和离子交换二步法纯化LTFPI；真核工程菌直接将上清进行二步纯化。获得的LTFPI半衰期明显延长，具有良好的抗凝功能。 | ||
| 搜索关键词： | 长效 重组 组织 因子 途径 抑制 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一类重组组织因子途径抑制物(TFPI)长效突变体，命名为长效组织因子途径抑制物(LTFPI)，其特征在于TFPI羧基末端267-304区域内的某些氨基酸突变后具有序列1的氨基酸序列，所述LTFPI的半衰期较TFPI延长10倍以上，具有抗组织因子、凝血因子VII/VIIa和凝血因子X/Xa功能。
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