[发明专利]同位素标记15N－L－天冬氨酸和15N－L－丙氨酸的制备方法

摘要

同位素标记¹⁵N－L－天冬氨酸和¹⁵N－L－丙氨酸的制备方法，利用微生物发酵产生天冬氨酸酶，将含有同位素标记氮15(¹⁵N)的无机原料和反丁烯二酸酶法合成含有氮15(¹⁵N)的L－天冬氨酸，同时，利用微生物发酵产生天冬氨酸β－脱羧酶，将¹⁵N－L－天冬氨酸酶法转化为¹⁵N－L－丙氨酸。上述方法避免了化学合成¹⁵N－DL－天冬氨酸和¹⁵N－DL－丙氨酸，再经拆分得到¹⁵N－L－天冬氨酸和¹⁵N－L－丙氨酸，使得¹⁵N－无机原料的利用率大幅提高，避免了纯发酵法¹⁵N－无机原料的利用率低，副产氨基酸较多，分离困难的缺点。最终反应液的¹⁵N－L－天冬氨酸浓度在8％以上；¹⁵N－无机原料的摩尔转化率在63％以上；提纯得到的产品纯度在99％以上；产品丰度在98.5％以上。

主权项

1.一种同位素标记15N-L-天冬氨酸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：先将碳源、氮源和微量元素配制成发酵培养基培养肠杆菌菌种(E.coli)A.S.1881，发酵生产含有天冬氨酸酶的游历细胞，然后将其加入到含有底物、同位素标记的氮源和微量元素的反应液中，调pH至7-10，于30-50℃，恒温培养反应24-48小时。