[发明专利]一种不需要分离DNA的反转录聚合酶链反应方法无效
| 申请号： | 03141989.5 | 申请日： | 2003-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN1580273A | 公开（公告）日： | 2005-02-16 |
| 发明（设计）人： | 徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧 | 申请（专利权）人： | 徐定邦;徐文慧 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200071上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种不需要分离DNA的反转录聚合酶链反应方法，即设计引物使以RNA为模板的RT－PCR扩增产物的解链温度比包含内涵子的以DNA为模板的扩增产物的解链温度低1－25℃，以克服现有RT－PCR方法难以排除样品中的DNA对以RNA为原始模板的RT－PCR的干扰的缺陷。一方面简化甚至省略了RNA与DNA的分离步骤，另一方面由于完全克服了DNA扩增产物的干扰，可使用简单的方法来检测反转录PCR扩增产物，能在分子生物学研究和临床高通量快速诊断中普遍应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 不需要 分离 dna 转录 聚合 反应 方法 | ||
【主权项】：
1.一种不受DNA干扰的反转录聚合酶链式反应方法，其步骤依次包括：(1)在反转录酶催化下，依据RNA链合成DNA模板；(2)DNA模板变性解链；(3)引物与模板退火；(4)在DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链；按步骤(2)-(4)循环进行合成反应，其特征在于设计引物使以RNA为模板的RT-PCR扩增产物的解链温度比包含内涵子的以DNA为模板的扩增产物的解链温度低1-25℃。
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