[发明专利]表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的酵母重组株及rhGM－CSF的纯化方法无效
| 申请号： | 03137202.3 | 申请日： | 2003-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN1487086A | 公开（公告）日： | 2004-04-07 |
| 发明（设计）人： | 梁国栋;周鹏;夏中宁;蒲广西;陈海宁 | 申请（专利权）人： | 海南国栋药物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/12;C12N15/27;C12P21/02;C07K14/535;C07K1/36;//;C12R1:84) |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 571101海南省海口城西仁*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM－CSF)的分泌型表达载体和一种简易纯化方法，用该分泌型表达载体转化的宿主细胞，以及用上述表达载体的毕赤氏酵母重组工程菌株发酵表达rhGM－CSF的方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统，目标蛋白rhGM－CSF不需要复性，其生物比活性可达到3.4×107单位/毫克蛋白，低毒副作用；因此，本发明的方法制得的rhGM－CSF不仅产率高，而且纯化工艺简便、成本低、产品毒副作用低。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 粒细胞 巨噬细胞 集落刺激因子 酵母 重组 rhgm csf 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1、一种表达重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分泌型表达载体，其特征在于，该载体含有：重组的rhGM-CSF序列，其被插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游位点，删除Kex2(Lys-Arg)位点之后的Ste13位点(Glu-Ala-Glu-Ala)和启始密码子ATG，构建成rhGM-CSF分泌型表达载体。
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