[发明专利]Y染色体多色荧光复合扩增试剂盒

摘要

一种Y染色体多色荧光复合扩增试剂盒，其特征是由分离包装的引物混合物、DNA聚合酶、缓冲液、MgCl₂和等位基因分型标准物混合物构成，所述引物混合物由四对荧光公共引物YA和YB1、YA和YB2、YA和YB3、YA和YB4以及对应于A、B、C、D四组Y染色体特异STR基因座的加尾引物混合而成。各组份的用量比为：引物混合物中荧光公共引物各0.25～0.35ml(400nM)，加尾引物各0.25～0.35ml(40nM)；DNA聚合酶3000u(3u/μl)；缓冲液3.25～4.25ml；MgCl₂2.5～3.5ml(2.25mM)；等位基因分型标准物混合物总量16ml(40nM)，等位基因分型标准物混合物中所含各个基因座的等位基因分型标准物等量。

主权项

1、一种Y染色体多色荧光复合扩增试剂盒，其特征是由分离包装的引物混合物、DNA聚合酶、缓冲液、MgCl2和等位基因分型标准物混合物构成，所述引物混合物由四对荧光公共引物YA和YB1、YA和YB2、YA和YB3、YA和YB4以及对应于A、B、C、D四组Y染色体特异STR基因座的加尾引物混合而成，其中，四对荧光公共引物YA和YB1、YA和YB2、YA和YB3、YA和YB4中的荧光公共引物YA和YB1、YB2、YB3、YB4为：YA(5′--GTTCTT-ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YB1(5′--F1-TAATACGACTCACTATAGGGAGAC-3′)YB2(5′--F2-TAATACGACTCAGTATAGGGACAG-3′)YB3(5′--F3-TAATACGACTCAATATAGGGATAA-3′)YB4(5′--F4-TAATACGACTCATTATAGGGAAAT-3′)；分别加于荧光公共引物YB1、YB2、YB3、YB4的5′端的F1、F2、F3、F4为荧光标记物；对应于A组Y染色体特异STR基因座的加尾引物YPA-A(P1)和YPB1-A(P2)为分别在A组基因座中的四个基因座的原始引物P1、P2的5′端加上公共引物YPA、YPB1：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB1(5′--TAATACGACTCACTATAGGGAGAC-3′)而得到的基因组序列；对应于B组Y染色体特异STR基因座的加尾引物YPA-B(P1)和YPB2-B(P2)为分别在B组基因座中的四个基因座的原始引物P1、P2的5′端加上公共引物YPA、YPB2：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB2(5′--TAATACGACTCAGTATAGGGACAG-3′)而得到的基因组序列；对应于C组Y染色体特异STR基因座的加尾引物YPA-C(P1)和YPB3-C(P2)为分别在C组基因座中的四个基因座的原始引物P1、P2的5′端加上公共引物YPA、YPB3：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB3(5′--TAATACGACTCAATATAGGGATAA-3′)而得到的基因组序列；对应于D组Y染色体特异STR基因座的加尾引物YPA-D(P1)和YPB4-D(P2)为分别在D组基因座中的四个基因座的原始引物P1、P2的5′端加上公共引物YPA、YPB4：YPA(5′--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3′)YPB4(5′--TAATACGACTCATTATAGGGAAAT-3′)而得到的基因组序列；所述等位基因分型标准物混合物由A、B、C、D四组Y染色体特异STR基因座中的各个基因座的等位基因分型标准物混合而成；各组份的用量比为：引物混合物中四对荧光公共引物YA和YB1、YA和YB2、YA和YB3、YA和YB4各0.25～0.35ml(400nM)，32条对应于16个Y染色体特异STR基因座的加尾引物各0.25～0.35ml(40nM)；DNA聚合酶3000u(3u/μl)；缓冲液3.25～4.25ml；MgCl22.5～3.5ml(2.25mM)；等位基因分型标准物混合物总量16ml(40nM)，等位基因分型标准物混合物中所含各个基因座的等位基因分型标准物等量。