[发明专利]一种重组人血管内皮细胞生长因子的制备方法和应用无效
| 申请号： | 03114994.4 | 申请日： | 2003-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN1431308A | 公开（公告）日： | 2003-07-23 |
| 发明（设计）人： | 宋后燕;王跃祥 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/81;A61K38/18;A61P7/06 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 包兆宜 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术领域，具体涉及一种重组人血管内皮细胞生长因子121(r－hVEGF121)及其制备方法和应用。本发明应用RT－PCR方法，扩增人VEGF121cDNA基因片段，与酵母表达载体pPIC9K重组，获得表达质粒p9KVEGF121，转化毕赤酵母菌GS115，筛选出高效表达工程菌株。工程菌经发酵、诱导表达，分离纯化后，纯度95％以上。实验证明本发明产物具有高效的促血管内皮细胞增殖功能和促血管通透作用和防治缺血性疾病的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 血管 内皮 细胞 生长因子 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种制备重组人血管内皮细胞生长因子121的方法，其特征在于采用下列步骤：(1)分离总RNA，用RT-PCR的方法克隆VEGF121cDNA基因；(2)VEGF121cDNA基因与表达载体重组；(3)用上述重组表达载体电穿孔法转化宿主细胞，使VEGF121cDNA基因以多拷贝形式与宿主细胞染色体发生重组；(4)培养宿主细胞，从培液中回收和纯化终产物；(5)生物学方法鉴定重组人血管内皮细胞生长因子121。
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