[发明专利]核酸扩增或检测用试剂的稳定化方法和保存方法无效
| 申请号： | 02815815.6 | 申请日： | 2002-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN1541267A | 公开（公告）日： | 2004-10-27 |
| 发明（设计）人： | 佐川裕章;上森隆司;向井博之;山本纯子;友野润;小林英二;榎龙嗣;浅田起代藏;加藤郁之进 | 申请（专利权）人： | 宝生物工程株式会社 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 刘玥;孟凡宏 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 利用嵌合寡核苷酸引物高灵敏度并特异地扩增样品中目标核酸所用的反应试剂的稳定化方法，及该反应试剂的长期保存方法；以及致病微生物和病毒的高灵敏度检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸 扩增 检测 试剂 稳定 方法 保存 | ||
【主权项】：
1.扩增和/或检测目标核酸的方法中所用的反应试剂的稳定化方法，包括：(a)将作为模板的核酸、脱氧核糖核苷酸三磷酸、具有链替代活性的DNA聚合酶、至少一种引物和RNase H混合，以制备反应混合物，其中的引物是与作为模板的核酸的核苷酸序列基本互补，并含有核糖核苷酸，以及选自脱氧核糖核苷酸和核苷酸类似物中至少一种的嵌合寡核苷酸引物，所述核糖核苷酸位于引物3’末端或3’末端一侧；并(b)通过温育该反应混合物足以生成反应产物的时间以扩增目标核酸，其中(i)至少一种选自镁盐、嵌合寡核苷酸引物和酶(DNA聚合酶和/或RNase H)的试剂组分在反应前是与其它试剂组分分离的；及(ii)含酶的试剂溶液的酶浓度被提高，而该溶液的盐浓度未被提高，且另一试剂溶液的盐浓度被调整，以使彼此分离的试剂溶液混合后可达到扩增步骤所需的最佳盐浓度。
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