[发明专利]合成单链核酸的方法无效
| 申请号: | 01821241.7 | 申请日: | 2001-10-26 |
| 公开(公告)号: | CN1483078A | 公开(公告)日: | 2004-03-17 |
| 发明(设计)人: | 长岭宪太郎;长谷哲;纳富继宣 | 申请(专利权)人: | 荣研化学株式会社 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 徐雁漪 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | 选择性和有效地合成双链核酸中的有义链和反义链中的一条链的方法。这种合成单链核酸的方法包括下列步骤:1)用一种限制性酶,以这样的方式切割在靶序列5’一侧中具有一个限制性酶识别序列的双链DNA,使得:a)形成具有突出3’末端的片段,且b)在所述切割后所述片段的单链区的碱基序列彼此不同;2)让至少在3’端具有与所述DNA片段中通过所述限制性酶切割而获得的单链区互补的碱基序列的引物,退火到所述单链区上;且3)用一种链置换型聚合酶从所述引物的3’末端开始,合成单链核酸。通过采用LAMP反应,扩增具有上述限制性酶识别位点的双链DNA,可以更加有效地合成单链核酸。 | ||
| 搜索关键词: | 合成 核酸 方法 | ||
【主权项】:
1.一种合成单链核酸的方法,所述方法包括以下步骤:1)用一种限制性酶,以这样的方式切割在比靶序列更靠近5’一侧的位置上具有一个限制性酶识别序列的双链DNA,使得a)形成具有突出3’末端的片段,且b)在所述切割后所述片段单链区的碱基序列彼此不同;2)让至少在3’端具有与所述DNA片段中经所述限制性酶切割出的单链区互补的碱基序列的引物,退火到所述单链区上;且3)用一种链置换型聚合酶从所述引物的3’末端开始,合成单链核酸。
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