[发明专利]基因重组体的定量检测方法和用于该方法的标准分子有效

专利信息
申请号: 01818075.2 申请日: 2001-10-24
公开(公告)号: CN1623002A 公开(公告)日: 2005-06-01
发明(设计)人: 日野明宽;松冈猛;栗原秀夫;吉村伦彰;进藤洋一郎;布藤聪;小川真智子 申请(专利权)人: 独立行政法人食品综合研究所;朝日啤酒株式会社
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京市金杜律师事务所 代理人: 陈文平
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要: 发明涉及一种利用PCR方法检测基因重组体的方法。提供了一种定量检测方法,利用该方法能够定量测定含有多种基因重组系的群体中基因重组体的总含量比和各基因重组体的分别的含量比。本发明的方法包括:用一种在单个分子上含有重组体特异的DNA序列和该重组体相应的种共有的内源DNA序列的分子作为标准分子,对重组体特异的DNA序列和对应于该重组体的物种所共有的内源DNA序列进行PCR,并确定其分子数的含量比。
搜索关键词: 基因 重组 定量 检测 方法 用于 标准 分子
【主权项】:
1.一种定量检测方法,用于定量测定至少含有一种基因重组系的样品中基因重组体的含量比,该方法包括:(i)对来源于样品中基因重组体的DNA样品中可能存在的基因重组体特异的DNA序列进行定量PCR,并对对应于该基因重组体的物种所共有的内源DNA序列进行定量PCR,其中使用一种在单个分子上含有所述基因重组体特异的DNA序列和该内源DNA序列的分子作为标准分子;(ii)根据定量PCR的结果,确定样品中基因重组体特异的DNA序列的数量;(iii)根据定量PCR的结果,确定样品中内源DNA序列的数量;和(iv)根据式(I)确定基因重组体的含量比:(样品中基因重组体的含量比)=100×[(样品中基因重组体特异的DNA序列的分子数)/(样品中内源DNA序列的分子数)]/(定量比)(%) (I)其中,定量比是根据式(II)预先计算的值中的任何一种:(定量比)(%)=(来自单个基因重组系的基因重组体特异的DNA序列的分子数)/(该基因重组体中所述内源DNA序列的分子数) (II)
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