[发明专利]一种T载体的制备方法无效
| 申请号： | 01129854.5 | 申请日： | 2001-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN1142279C | 公开（公告）日： | 2004-03-17 |
| 发明（设计）人： | 王珣章;贺雄雷;付捷;龙綮新 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N15/64 | 分类号： | C12N15/64;C12N15/09 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510275广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用内切酶消化前T载体得到T载体的方法。本发明应用单链或双链寡DNA作为外切酶的竞争性底物，在不过度增加总DNA浓度的情况下，向生产T载体的过消化体系中添加至少10倍于前T载体摩尔浓度的外切酶竞争性底物以抑制外切酶活性对所得T载体的影响，从而得到质量稳定的优良T载体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 载体 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种T载体的制备方法，将两个产3’末端单核苷酸突出的内切酶识别序列以反向重复方式插入自身不含相应酶切位点的载体，而且将识别序列中切割位点5’上游的第1个碱基设为T，得到前T载体，用内切酶过消化该前T载体，得到成熟T载体；其特征是用内切酶过消化前T载体时，在酶切反应体系中添加至少10倍于前T载体摩尔浓度的外切酶竞争性底物。
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