[发明专利]适冷风味蛋白酶的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种新的适冷风味蛋白酶的的制备方法及其应用，属于食品生物技术领域。以蛋白酶产率高的深海适冷菌假单胞菌为菌株，通过液体深层发酵技术制备发酵液，然后经离心、低温超滤浓缩、添加蔗糖作为稳定剂而成产品。本发明产品适冷风味蛋白酶的最适酶活温度30～35℃，0℃下仍保持最大酶活的20～25％；最适pH为8.0。以适冷风味蛋白酶为酶制剂，喷洒1～2％风味适冷蛋白酶于畜禽肉或海产品的表面，真空包装，快速冷却，二次包装，入0℃库，成为风味冰鲜品。适冷蛋白酶在冰鲜保存过程中，能够部分酶解肉中的蛋白质，释放游离氨基酸，增加肉类的风味。

主权项

1.一种适冷风味蛋白酶的制备方法，包括如下步骤： (1)种子的制备 培养基：豆饼粉2.5～3.5份、玉米2.5～3.5份、麸皮1.0～2.0份、Na₂HPO₄0.3～ 0.4份、KH₂PO₄0.03～0.05份和水100份，均为重量份，灭菌、冷却后，以深海适冷菌 假单胞菌Pseudomonassp.SM9913为菌株，接茄子瓶菌种的菌悬液，接种量5～7％重量 百分比，通风、搅拌，培养； (2)液体深层发酵制备适冷风味蛋白酶制剂 培养基：豆饼粉3.5～4.0份、玉米粉2.0～2.5份、山芋粉2.0～3.5份、麸皮2.0～ 2.5份、Na₂HPO₄0.3～0.4份、KH₂PO₄0.04～0.05份和水100份，均为重量份，灭菌， 接种上述步骤制备的种子5～7％重量百分比，通风、搅拌，控温，发酵培养； (3)蛋白酶发酵液的后处理 发酵液经10000rpm离心，然后用截留5000分子量以上的超滤膜，在0～4℃超滤 浓缩至原体积的20～30％，然后加入4～5％的蔗糖作为稳定剂。