[发明专利]从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法无效
| 申请号： | 00119589.1 | 申请日： | 2000-08-10 |
| 公开（公告）号： | CN1286259A | 公开（公告）日： | 2001-03-07 |
| 发明（设计）人： | 邱蔚然;丁庆豹;高淑红;谢胜 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;山东双凤股份有限公司 |
| 主分类号： | C07H21/00 | 分类号： | C07H21/00;C07H1/06 |
| 代理公司： | 中原信达知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 文琦 |
| 地址： | 20023*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法。本发明通过阳阴离子交换树脂的有序排列组合,一次分离纯化得到高纯度单核苷酸。本发明采用二根阳离子交换树脂柱、一根大孔弱碱阴离子交换树脂柱和一根弱碱阴离子交换树脂柱,将酶解液串联上柱,分段洗涤,一次性高收率地分离出纯度为98%以上的核苷酸。本发明公开的方法,收率高、分离效果好、所得产品纯度高,产品不易污染,适合大规模工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 核糖 核酸酶 解液中 分离 核苷酸 方法 | ||
【主权项】：
1．一种从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法，其特征在于，通过阳阴离子交换树脂的有序排列组合，一次分离纯化得到高纯度单核苷酸，依次包括如下步骤：①含有四种5’-核苷酸核的RNA酶解液按序流过两根强酸阳离子交换树脂柱(1)和(2)、一根弱碱大孔阴离子交换树脂柱(3)、一根强碱阴离子交换树脂柱(4)；②用酸性氯化钠溶液洗脱强碱阴离子交换树脂柱(4)，收集流出的含有5’-UPM的溶液；③用去离子水洗涤两根强酸阳离子交换树脂柱(1)和(2)，在第二根强酸阳离子交换树脂柱(2)处先收集纯度较高的5’-GMP溶液，然后收集5’-CMP溶液；④用去离子水洗涤第一根强酸阳离子交换树脂柱(1)，在第一根强酸阳离子交换树脂柱(1)的底部收集纯度较高的5’-AMP溶液；采用常规的精制方法分别对收集的溶液进行处理，即可获得所说的四种5’-核苷酸。
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