[发明专利]佐剂组合物

说明书

本发明涉及包含聚氧乙烯醚或聚氧乙烯酯和可药用赋形剂的佐剂组合物，和包含所述佐剂组合物与抗原的疫苗。此外，本发明还涉及聚氧乙烯醚或聚氧乙烯酯在制备佐剂制剂和疫苗制剂中的应用，及其作为药物的应用。

粘膜接种，例如鼻内和口内接种可代表着容易且比通过系统注射的常规接种更方便的接种途径。采用注射来给予一定剂量疫苗具有很多缺点，即注射后引起注射位点疼痛和刺激。这些因素可导致“针头恐惧”，已知这种“针头恐惧”会导致患者不愿意接种疫苗。此外，常规系统注射可能是导致皮肤穿刺区域感染的根源。

除了绕开注射需求之外，粘膜接种之所以具有吸引力还是因为，据在动物中显示，通过粘膜给予抗原在诱导的粘膜表面的保护反应方面具有更大效力，粘膜表面是多种病原体进入的途径。此外，已经有人提出，粘膜接种例如鼻内接种不仅在鼻粘膜中诱导粘膜免疫，还在远处粘膜位点例如生殖粘膜中诱导粘膜免疫(Mestecky，1987，《临床免疫杂志》(Journal of Clinical Immunology)，7，265-276；McGhee和Kiyono，传染媒介和疾病(Infectious Agents andDisease)，1993，2，55-73)。

为了使粘膜免疫接种替代通过注射的免疫接种或成为其可供选择的代替途径，该接种途径必须能诱导效力至少与注射诱导的系统免疫反应一样大的系统免疫反应。虽然据报道，当通过该途径接种时有一些抗原能诱导系统反应(Cahill等人，1993，FEMS Microbiology Letters，107，211-216)，但是大多数通过鼻内接种的可溶性抗原其自身仅能诱导很小免疫反应或不能诱导任何免疫反应。

有很多作者已经研究了有潜力的粘膜佐剂来克服这个问题，所述粘膜佐剂是通过包括下述机制在内的各种机制来发挥其佐剂活性的：将抗原包封(例如脂质体和微颗粒)；或通过与靶细胞直接作用，然后从靶细胞释放免疫刺激性细胞因子(例如霍乱毒素和大肠杆菌热不稳定毒素)；或通过增强穿过上皮的抗原摄取(例如霍乱毒素)。

本申请人惊讶地发现，聚氧乙烯醚和聚氧乙烯酯能起疫苗佐剂的作用。本发明佐剂安全、易于灭菌、并便于给予。有利的是，当粘膜给予时，本发明组合物能足以诱导系统免疫反应，其所诱导的系统免疫反应至少与常规注射疫苗后所观察到的系统免疫反应一样高。

Merk索引(12thed：entry 7717)中描述了聚氧乙烯醚例如聚氧乙烯十二烷基醚，其中所指出的治疗应用包括：局部麻醉；抗痒；和硬化剂活性。从类别上看，这些聚氧乙烯醚或聚氧乙烯酯是非离子表面活性剂。

据描述，鼻内给予聚氧乙烯醚和酯可用于增强胰岛素在鼻腔内的吸收(Hirai等人，1981，《国际药剂学杂志》(International Journal ofPharmaceutics)，9，165-172；Hirai等人，1981，《国际药剂学杂志》(International Journal of Pharmaceutics)，9，173-184)。

其它非离子表面活性剂已用于疫苗制剂。据报道，包含聚氧乙烯蓖麻油或辛酸/癸酸甘油酯与聚氧乙烯脱水山梨醇单酯的混合物以及抗原的疫苗制剂局部施予粘膜后能诱导系统免疫反应(WO 9417827)。该专利申请公开，TWEEN20^TM(聚氧乙烯脱水山梨醇单酯)和Imwitor742^TM(辛酸/癸酸甘油酯)的组合，或TWEEN20^TM与聚氧乙烯蓖麻油的组合能增强鼻内免疫接种后的系统免疫反应。文献中也已经详细描述了该制剂增强对鼻内给予抗原的免疫反应的作用(Gizurarson等人，1996.Vaccine Research，5，69-75；Aggerbeck等人，1997.Vaccine，15，307-316)。

Novasomes(US 5147725)是包封抗原的包含聚氧乙烯醚和胆固醇的paucilamenar囊状结构，并且在系统给予后能增强对抗原的免疫反应。

已经将表面活性剂以这样的方式配制以使之形成非离子表面活性剂囊(通常称为新成体，WO 95/09651)。在胆固醇存在下，这种囊形成能把抗原吸引入内水相或其自身双层的脂双层囊内。

本申请人惊奇地发现，相当低浓度的聚氧乙烯醚或酯能显著地增强对一起给予的抗原的系统免疫反应。此外，当用于粘膜疫苗制剂中时，这些佐剂的增强作用将系统免疫反应提高到与通过常规系统注射抗原所获得的系统免疫反应相等或比其要高的水平。这些分子代表一类适用于人常规系统接种疫苗或替代系统接种的粘膜接种的佐剂。