[发明专利]烛台霉属在农业上的应用

说明书

本发明涉及肉食性真菌微生物在农业上的应用。

线虫广泛地危害农作物，已为众人确认，据美国农业部推算，接近虫害总和的10％。线虫寄主的专化性不强，虽不确切知道某种线虫可以侵染所有植物，但可以说没有一种维管束植物对所有寄生线虫都是免疫的，故线虫之危害显而易见。本世纪廿年代引起生物界的关注，四十年代生产出高效杀线剂，如呋喃丹。采用化学杀线剂，对人畜有不同程度的毒害，污染了环境；寄主植物有残毒留余，属食物者为人们所忌；用化学杀线剂呋喃丹用久了，线虫产生抗药性，不得不增大药量，成本越来越高，环境污染日趋严重。而线虫在我国南方每年繁殖有4至5个世代或更多。

为保持一个良好的生态环境，防止土壤污染，人们把目光投注于生物防治。据1989年1期《植物保护》介绍的“一种防治线虫的真菌”。淡紫色拟青霉Paccilomyces lilacinus是土壤兼性腐生菌，与线虫的包囊或卵接触后，伸入卵壳。在卵壳中发生了一系列超结构变化，使卵壳破裂。若卵内已形成幼虫，这种真菌效力就大大削弱。此种真菌的缺陷还在于：要在播前施入地下，作物生长期再施就收效甚微了；据报导称也只能局限于马铃薯根结线虫；效果与呋喃丹相仿。

本发明的目的在于向公众公开一种，可用于多种植物的、不污染环境的、多年生宿根植物次年仍有效的、肉食性捕捉线虫的真菌烛台霉属Candelabrella

本发明是真菌中烛台霉属Candelabrella sp，以纯株方法，于1993年10月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCC 0201号。据保藏单位1993年10月18日检测，菌株存活。

本菌的筛选方法分别采用琼脂圆片法、琼脂条带法、土壤平板法(此三法见L、F、约翰逊·E·A柯尔，土壤植物病原菌生态研究法，北京农业大学植病研究室)、直接解剖法、贝曼漏斗法(此二法见1979农业出版社，植物研究方法，方中达)。此五种方法采用任何一种，直接从不同地区富有腐植质的不同植物根际土壤中和病株的线虫上，分离出

本菌丝无色，分生孢子梗细长，直立，无色，端生小的叠生星状分枝，状似烛台而得名。顶生2至5个细胞的分生孢子，无色长棒形。在中性或碱性条件下，呈倒梨形或椭圆形，菌丝上可产生具有三个长形细胞相连围成的环，即捕食线虫的器官，线虫碰触其内侧则细胞膨胀而钳住线虫。其分泌物可消解线虫，即捕食线虫。本菌株对线虫的捕势强而稳定。本菌生长适温范围广。在摄氏20～30度之间均能正常生长。性喜微酸。喜氧耐水。

据本发明的形态确认为属真菌门(Fungi)半知菌类(Fungiimperfecfi)，丛梗孢目(Moniliales)，丛梗孢科多孢亚科(Phragmosporoideae Moniliaceae)烛台霉属(Candelabre lla sp)。

采用玉米粉培养基，(琼脂20克  玉米粉20克  水1000毫升)。把装有培养基皿置于摄氏20至30度，酸碱度4.5-9可筛选出适应高温条件下的菌种。在培养皿内接入线虫，杂菌消灭掉。菌种长出后，可用作原种(即一级种)，待一级菌种长成后，将菌种移入二级种培养基。在摄氏20-30℃条件下，需7-14天。

二级种培养基的组成是：煮软的高粱占体积的90％，谷壳占体积10％，水少许，能使培养基湿润即可。培10-14天后移入三级种培养基，温度同上。

三级种培养基的组成是：煮软的高粱占体积的30％，麦麸占体积的30％，谷壳占40％，水少许，(1650至1760毫升之间)。室温20-30度，培养10-14天。

施用该菌种前一个月，按每亩用量菌肥8至10斤算好。与菌种等体积的腐熟的有机肥料，拌匀。上盖塑料薄膜、沤制，用时把混有菌种的有机肥，施在作物根部周围即可。

如发现菌株退化，可复壮菌株。在高倍显微镜下，选择好的单孢子，用针尖在无菌条件剥离。再在玉米粉培养基上培养。培养温度为摄氏20-28度，复壮一代。或者玉米粉培养基和P·D·A培养基更替使用，更替一次就行了。

附图说明：

图1  烛台霉属分生孢子枝示意图

图2  烛台霉属捕捉环示意图

图3  烛台霉属在碱性条件下分生孢子示意图