[发明专利]青年型糖尿病的治疗

说明书

本发明涉及通过胃泌素/胰酶分泌素（CCK）受体配基（特别是胃泌素）和表皮生长因子（EGF）受体配基（特别是转化生长因子α（TGFα））的联合协同刺激作用，影响胰岛前体细胞向成熟的胰岛素生成细胞的分化，以治疗幼年型糖尿病。

胰岛由存在于胎儿小管胰内皮中的内胚层干细胞发育而成，后者还包含发育成外分泌胰腺的多潜能干细胞（Teitelman，G.    and    J.K.Lee，Developmental    Biology，121∶454-466（1987）;Pictet，R.    and    W.J.Rutter，Development    of    the    embryonic    endocrine    Pancreas，in    Endocrinology，Handbook    of    Physiology，ed.R.O.    Greep    and    E.B.Astwood（1972），American    Physiological    Society:Washington    D.C.，p.25-66）。胰岛在胎儿妊娠期间通过非连续的发育状态发育，这些非连续发育因鲜明的（多次）转变而加强。如由胰岛素和胰高血糖素的表达所显示的，初始期是以这些多潜能干细胞投入胰岛细胞谱系为特征的原始分化状态。这些原始分化的细胞只表达低水平胰岛素特异性基因产物并缺少成熟胰岛细胞之细胞分化的定型胰岛前体细胞群体（Pictet，R.and    W.J.Rutter，文献同上）。在小鼠体内妊娠约16天，原始分化胰腺开始进入以胰岛细胞的细胞分化为特征的迅速生长和分化阶段，并且胰岛细胞特异性基因表达呈数百倍增加。从组织学上看，胰岛形成（新生）因源于胰管的增殖胰岛芽（胰岛胚芽生成）而变得明显。临出生之前，胰岛生长速度变慢，并且胰岛新生和胰岛胚芽生成变得极不明显。与此相随的是，胰岛达到一个充分分化的状态，同时出现最大水平的胰岛素基因表达。因此，与许多器官相似，细胞分化的完成是与降低了的再生潜力相关联的。

因为原始分化之前体的分化发生在胰的胚胎发育晚期，所以调节胰岛分化的因子很可能是在这个阶段在胰中被表达的。在胰岛发育期间表达的基因之一编码胃肠激素肽，即胃泌素。虽然胃泌素在成人体内作为调节酸分泌的胃激素发挥作用，但在胎儿体内胃泌素表达的主要部位却是胰岛（Brand，S.J.and    P.J.Fuller，J.Biol.Chem.，263∶5341-5347（1988））。胃泌素在胰岛中的表达是短暂的，它被限制在原始分化的胰岛前体形成分化的胰岛这一阶段。虽然尚不明了胰胃泌素在胰岛发育中的重要性，但一些临床观察提示胃泌素在该胰岛发育中具有下述作用。例如，由表达胃泌素的胰岛细胞肿瘤和萎缩性胃炎引起的高胃泌素血症与相似于分化胎幼胰岛中所见的胰岛胚芽生成相关（Sacchi，T.B.，et    al.，Virchows    Archiv    B，48∶261-276（1985）;和Heitz，P.U.et    al.，Diabetes，26∶632-642（1977））。另外，在胎儿胰岛胚芽生成的病例中记录过异常长时间持续的胰胃泌素（Hollande    E.，et    al.，Gastroenterology，    71∶255-262（1976））。然而，在两种情况下都没有确立胰岛胚芽生成和胃泌素刺激间的因果关系。

不应把本文引用的参考文献看作是承认这些参考文献为本发明的现有技术。

本发明提供了以足以影响胰腺胰岛前体细胞分化为成熟的胰岛素分泌细胞的量给药提供胃泌素/CCK受体配基（如胃泌素），和EGF受体配基（如TGFα）的组合物，以治疗糖尿病的方法。该组合物可以全身给药或由补充有于表达载体中之核酸融合构建体的细胞在原位表达。该融合构建体包含前原胃泌素肽前体编码顺序，且还可包含EGF受体配基的编码顺序。

总地说来，下文报导的研究工作证明，现已用胃泌素/CCK受体配基（如胃泌素）和EGF受体配基（如TGFα）刺激，在动物体内的成年人胰脏的小管上皮中重新激活完全胰岛细胞新生。这些研究证明并确信为达到预想的目的，需要两种类型的生长因子，单用那一种都是不够的。有关胰脏中TGFα和胃泌素的转基因过表达，用于阐述胰胃泌素表达在胰岛发育中所起作用的研究工作已有报道，并表明了TGFα和胃泌素在调节胰岛发育中各自发挥作用。