[发明专利]乙肝速测试剂药盒及其制备方法

权利要求书

1、一种乙肝速测试剂药盒，包括六个小瓶分装的六种试剂，其中测抗-HBsAg、抗-HBeAg、抗-HBcAg的乳凝抑制试验所用的抑制抗原是直接利用了纯化的HBsAg、HBeAg、HBcAg，分别将其做为(4)、(5)、(6)号试剂，其特征在于：其余三种试剂的组成分别为：

(1)HBsAg反向乳凝试剂组成：聚苯乙烯胶乳上包被有抗-HBs单克隆抗体；

(2)抗-HBc乳凝抑制试剂组成：聚苯乙烯胶乳上包被有抗-HBc单克隆抗体；

(3)HBeAg反向乳凝试剂组成：聚苯乙烯胶乳上包被有抗-HBe单克隆抗体；

聚苯乙烯胶乳的体积百分含量为5％，各抗体与聚苯乙烯胶乳的体积比为1∶20。

2、一种权利要求1所述的乙肝速测试剂药盒的制备方法，其特征在于：所制备的试剂为(1)HBsAg反向乳凝试剂、(2)抗-HBc乳凝抑制试剂、(3)HBeAg反向乳凝试剂；采用聚苯乙烯胶乳作为载体，取抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc单克隆抗体各一份，分别与等容量的体积百分含量为5％的聚苯乙烯乳胶混匀，每组置37℃水浴中30分钟，每10分钟摇一次，以3000转/分转速进行分离，弃去上清液，剩下沉淀用体积百分含量为0.4％牛血清白蛋白生理盐水悬浮至1％体积比乳浓，用各致敏抗体的相应抗原按不同稀释度倍比稀释后测效价，各抗体抗原与聚苯乙烯胶乳的最合适体积比例为1∶20。

3、根据权利要求1所述的乙肝速测试剂药盒，其特征在于：六种试剂的实施用法为：

(1)测HBsAg、HBeAg：取病人血清25微升滴于清洁的乳凝反应圈内；分别加25微升(1)号HBsAg反向乳凝试剂和(3)号HBeAg反向乳凝试剂，用清洁小棒混匀；连续转摇1～3分钟，然后立即记录结果；出现清晰凝集者为阳性，不凝集或可疑凝集者为阴性，如果测效价可将阳性标本用生理盐水作倍比稀释检测，以定效价；

(2)测抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc：取病人血清及阴性对照血清各25微升分别滴于清洁的乳凝反应圈内；分别加25微升纯化的(4)、(5)、(6)号试剂HBsAg、HBeAg、HBcAg做为抑制抗原，抑制标本的抗-HBsAg、抗-HBeAg、抗-HBcAg与反向乳凝试剂发生凝集反应，用小棒浊匀，置37℃温箱孵育5分钟，然后各加25微升(1)、(2)、(3)号试剂，写上试剂名称，混匀、摇动反应板，5分钟后观察结果，出现清晰凝集者为阴性，不凝集或可疑凝集者为阳性。

4、根据权利要求3所述的乙肝速测试剂药盒，其特征在于：凝集反应强度的判断标准为：

“++++”全部呈颗粒状凝集，周围边有凝集圈，液体清亮；“+++”大部分凝集，周围边有凝集圈，液体微浊；“++”约半量凝集，颗粒较细，液体混浊；“+”少许凝集。