[发明专利]VvMYBPro基因及应用和高效合成单宁的方法

权利要求书

1.VvMYBPro基因在酿酒葡萄赤霞珠愈伤组织细胞工厂高效合成葡萄单宁的应用。

2.VvMYBPro基因，其特征在于：其编码序列为：ATGGGGAGAGCTCCATGTTGTGAGAAGATGGGGTTGAAGAAAGGTCCATGGACTCCCGAAGAAGATCAGATTTTGGTCAATTACATCCACCTTTATGGCCATGGAAACTGGAGGGCACTTCCCAAACAAGCTGGCTTATTGAGGTGTGGAAAGAGTTGCAGACTTCGATGGACGAATTATCTGAGGCCGGATATCAAACGGGGAAACTTCACCAGTGAAGAAGAAGAAACCATCATCGAGTTACATGAAAGGCTGGGCAATAGATGGTCAGCGATAGCAGCGAAACTACCGGGGAGGACAGACAATGAGATAAAAAATGTGTGGCACACCCACTTGAAGAAGAGGCTCAAGCACAACCACGCCACGCCACCCCCTAAAAGACACTCTCTTGATGCGTCCCAAGTCGAAAAACAACAAAACCCCATTAATTCTGCAACCAATTCGAGATCGGAGAGCCTTGGGTATGGACCAGTACTGTCCCCACAGCCGTCCTTTAGCGATATCTCCTCAGCCGCCACCACCACGACCACCACGACCACCGCCACCATGTCCGACATTACTACACCCTGCATTAAGGTCGATTCACCGGAGGATTTCCCAGAAATGGACGAGAATTTCTGGTCGGAAGTACTGTCATCCAACAAATCCGGCGCGGCGGGTGATTTGCCAGGGGCGGCCAGTGGTCCACAGCTTCAGTTTCCATTCTCTCCGCGTGCTGTCATTGGCAGTAGTCCATATAGCACGTATGACATGGACATGGAATTTTGGTACAATATTTTCACAAGGTCCGGGGAGTTGCATGAATTATCAGAAATATGA。

3.一种利用VvMYBPro基因高效合成单宁的方法，其特征在于：利用基因VvMYBPro构建过表达载体，侵染至赤霞珠愈伤组织，通过培养提高单宁合成量。

4.根据权利要求3所述的一种利用VvMYBPro基因高效合成单宁的方法，其特征在于：所述赤霞珠愈伤组织获得培养方法为：在葡萄花序变大、小花蕾之间刚刚分离开始于田间采集葡萄花序，将花序切成花生粒大小，在MS培养基接种消毒后的花序，接种外植体后放入组培室于 25 ℃黑暗条件下培养，4 周继代一次。

5.根据权利要求4所述的一种利用VvMYBPro基因高效合成单宁的方法，其特征在于：转基因赤霞珠愈伤组织培养条件为：侵染后将愈伤转移至表面铺一张无菌滤纸的新的继代培养基，暗培养2-4天，将转基因愈伤组织转移至含有卡那、头孢、羧卞霉素的选择培养基上，诱导转基因愈伤，后续每隔4周更换继代至新的选择培养基上，24±2℃下遮光培养，直至农杆菌侵染的材料表面长出一层新的愈伤组织，将其转移进行扩繁。

6.根据权利要求5所述的一种利用VvMYBPro基因高效合成单宁的方法，其特征在于：优选第3天将转基因愈伤组织转移至含有卡那、头孢、羧卞霉素的选择培养基上。