[发明专利]肿瘤特异性免疫细胞标志物及其用途

权利要求书

1.一种免疫细胞标志物组合，包括：(1)免疫细胞活化标志物，和(2)免疫细胞抑制标志物，所述标志物组合任选地还包括(3)胞内标志物，和/或(4)组织驻留记忆标志物，

优选地，所述胞内标志物包括：胞内细胞因子和/或免疫细胞胞内活化标志物，

更优选地，

所述免疫细胞活化标志物为免疫细胞表面标志物，优选地，所述免疫细胞活化标志物包括选自CD25、CD38、CD69、CD137、CD107a、CD226、CD150和Ly108中的一种或多种，和/或

所述免疫细胞抑制标志物包括选自CD39、PD-1、TIM3、LAG3、CTLA-4、TIGIT、CD101、CD160和CD161中的一种或多种，和/或

所述胞内细胞因子包括选自胞内IFN-γ、TNF-a、CXCL10、CXCL13、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8和IL-10中的任一种或多种，和/或

所述胞内活化标志物包括选自胞内CD137、胞内CD69和胞内CD107a中的任一种或多种，和/或

所述组织驻留记忆标志物包括选自CD69、CD103和CD49a中的任一种或多种。

2.检测权利要求1所述的免疫细胞标志物组合的试剂，所述试剂是特异性识别各标志物的结合分子，

优选地，

所述结合分子是抗体或其抗原结合片段，和/或

所述结合分子偶联有可检测标记物，例如生物素或荧光基团。

3.一种组合物，包含权利要求1所述的免疫细胞标志物组合或权利要求2所述的试剂。

4.一种鉴定或制备肿瘤特异性免疫细胞的试剂盒，包含权利要求1所述的免疫细胞标志物组合、权利要求2所述的试剂、或权利要求3所述的组合物，

优选地，所述试剂盒还包括免疫反应试剂。

5.鉴定肿瘤特异性免疫细胞的方法，包括检测免疫细胞的权利要求1所述的免疫细胞标志物组合的表达，其中表达阳性的是肿瘤特异性免疫细胞，所述免疫细胞优选是T细胞、NK细胞、NKT细胞或TIL。

6.筛选肿瘤特异性免疫细胞的方法，包括筛选免疫细胞群中权利要求1所述的免疫细胞标志物组合表达阳性的细胞，所述免疫细胞优选是T细胞、NK细胞、NKT细胞或TIL。

7.权利要求1所述的免疫细胞标志物组合、权利要求2所述的试剂和/或权利要求3所述的组合物在制备产品中的用途，所述产品用于鉴定或制备肿瘤特异性免疫细胞，

优选地，

所述免疫细胞是T细胞、NK细胞、NKT细胞或TIL，和/或

所述产品是试剂盒或装置。

8.制备肿瘤特异性免疫细胞的方法，包括：从分离的肿瘤浸润淋巴细胞中筛选权利要求1所述的免疫细胞标志物组合表达阳性的细胞，

优选地，

所述免疫细胞是T细胞、NK细胞或NKT细胞，和/或

所述分离的肿瘤浸润淋巴细胞来源于选自下组的样品：有需要的受试者的腹水、手术切除原发灶样品、同时性和异时性手术切除转移灶样品、穿刺样品和体液，和/或

所述分离的肿瘤浸润淋巴细胞来源于选自下组的肿瘤：黑色素瘤、胶质瘤、胃癌、肺癌、胃肠道间质瘤、肠癌、肝癌、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、子宫内膜间质肉瘤、盆腔低分化腺癌和胆管癌。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括从肿瘤样品获得分离的肿瘤浸润淋巴细胞的步骤，和/或所述方法还包括进一步培养获得的肿瘤特异性免疫细胞的步骤，

优选地，从肿瘤样品获得分离的肿瘤浸润淋巴细胞的步骤包括：(1.1)从肿瘤样品获得种子细胞，例如使用种子细胞培养基培养肿瘤样品获得种子细胞，和(1.2)培养种子细胞获得分离的肿瘤浸润淋巴细胞。

10.权利要求8或9所述的方法制得的肿瘤特异性免疫细胞在制备癌症治疗药物中的应用。