[发明专利]一种可特异性清除MHCII+

说明书

本发明公开一种可特异性清除MHCIIsupgt;+/supgt;脂肪细胞的基因工程小鼠及MHCIIsupgt;+/supgt;脂肪细胞的制备方法及应用。基因工程小鼠的制备方法：(1)在H2‑Aa基因最后一个外显子后插入一个‑loxp‑STOP‑loxp‑DTR‑片段，由于STOP片段阻断基因转录，该小鼠所有细胞都不能表达DTR；(2)将该小鼠与Adipoq‑cre小鼠杂交后，只有脂肪细胞中的STOP片段将被切除，这样同时表达H2‑Aa基因和cre基因的MHCIIsupgt;+/supgt;脂肪细胞就能够表达DTR，得到aH2‑Aasupgt;DTR/supgt;小鼠；(3)aH2‑Aasupgt;DTR/supgt;小鼠通过与纯种C57BL/6J小鼠杂交5代纯化遗传背景后用于后续实验研究。本发明还提供MHCIIsupgt;+/supgt;脂肪细胞在制备改善肥胖诱导的胰岛素抵抗的产品中的应用、在制备改善肥胖诱导的脂肪组织Th1细胞浸润的产品中的应用、在制备改善肥胖诱导的脂肪组织M1巨噬细胞浸润的产品中的应用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种可特异性清除MHCII⁺脂肪细胞的基因工程小鼠及MHCII⁺脂肪细胞的制备方法及应用。

背景技术

肥胖已成为全球范围内的流行病。肥胖的主要危害在于它可以引起胰岛素抵抗，促进糖尿病、心血管疾病和癌症等众多并发症。大量研究表明慢性炎症是肥胖并发症的关键机制，而内脏脂肪组织是肥胖诱导的慢性炎症发生和发展的关键部位。自从1993年Science杂志发表文章报道了肥胖小鼠脂肪组织高表达炎症因子TNFα，已有近万篇论文研究了脂肪组织炎症的发生机制及其在肥胖相关代谢性疾病中的关键作用，上百项临床试验测试了抗炎疗法对代谢性疾病的作用。尽管有些疗法取得了阶段性的成功，但目前还没有任何抗炎疗法获得美国食品药品管理局(FDA)的批准用于治疗代谢性疾病。失败的主要原因在于，目前测试的抗炎疗法都是针对经典的免疫细胞和免疫信号分子，这些疗法可能提高病人发生感染和肿瘤的风险，不适合用于治疗通常是慢性病的代谢性疾病。寻求可以特异性抑制脂肪组织炎症而不影响全身免疫力的新方法，将为代谢性疾病的免疫疗法带来新希望。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种可特异性清除MHCII⁺脂肪细胞的基因工程小鼠的制备方法。

进一步地，本发明还提供从上述基因工程小鼠中提取得到的或从动物或人类的脂肪组织提取得到的MHCII⁺脂肪细胞。

进一步地，本发明还提供上述MHCII⁺脂肪细胞的制备方法。

更进一步地，本发明提供上述MHCII⁺脂肪细胞在制备改善肥胖诱导的胰岛素抵抗的产品研究中的应用。

更进一步地，本发明提供上述MHCII⁺脂肪细胞在制备改善肥胖诱导的脂肪组织Th1细胞浸润的产品研究中的应用。

更进一步地，本发明提供上述MHCII⁺脂肪细胞在制备改善肥胖诱导的脂肪组织M1巨噬细胞浸润的产品研究中的应用。

更进一步地，本发明还提供上述MHCII⁺脂肪细胞磁珠分选技术的应用。

本发明的技术方案是：

一种可特异性清除MHCII⁺脂肪细胞的基因工程小鼠的制备方法：