[发明专利]一种抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的测试装置及其测试方法

权利要求书

1.一种抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的测试装置，其特征在于，包括：滴液瓶、测试卡；

所述滴液瓶的滴液瓶盖上带有过滤全血的滤片，且滤片的边缘和滴液瓶盖无缝衔接；

所述测试卡包括下盖、与下盖适配的上盖、NC膜、吸水纸；所述下盖内设有容纳槽，容纳槽两侧还设有台阶位；所述NC膜、吸水纸置于容纳槽内；所述NC膜置于吸水纸上；

所述上盖开设有加液孔，用于滴液瓶进行滴液后，流入NC膜上，所述上盖底部还设有向外延伸的凸块；所述上盖置于下盖上时，对应的凸块置于台阶位上。

2.根据权利要求1所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的测试装置，其特征在于，所述滴液瓶中放有和红细胞等渗的缓冲液用来稀释全血。

3.根据权利要求1所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的测试装置，其特征在于，所述滤片的孔径为不大于5μm。

4.根据权利要求1所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的测试装置，其特征在于，所述NC膜为不小于1cm×1cm的方形，其中央位置设有圆形斑点。

5.根据权利要求1所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的测试装置，其特征在于，所述吸水纸为不小于1cm×1cm的方形，且吸水纸的厚度为不小于2mm。

6.一种抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤S1、测试时用末梢血采血针和毛细管采血后，将毛细管插入滴液瓶中；

步骤S2、混匀后滴稀释后的样本到测试卡的加液孔内，流入到NC膜上，再滴入清洗液；

步骤S3、然后滴入显色剂A，再滴入清洗液，再滴入溴甲酚绿(BCG)或溴甲酚紫(BCP)或双缩脲试剂到NC膜上，并在一定温度下反应一段时间后在反射/荧光分析仪中测定信号强度；

步骤S4、测定GA的浓度：根据荧光信号强弱和糖化白蛋白的浓度成正比，可以由此来计算GA的浓度；

步骤S5：测定总蛋白(GA+HSA)的浓度：根据吸光度的大小分别和总蛋白(GA+HSA)的浓度成正比，可以由此来计算总蛋白(GA+HSA)的浓度。

7.根据权利要求6所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的方法，其特征在于，所述步骤S2中的NC膜选用赛多利斯CN140规格，用喷雾的方式喷人血清白蛋白多克隆抗体溶液圆形斑点，然后在30℃～50℃鼓风干燥箱内烘干24～72h，并切成不小于1cm×1cm的方形NC膜，并使圆形斑点居于中央位置。

8.根据权利要求7所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的方法，其特征在于，所述人血清白蛋白多克隆抗体溶液圆形斑点的材料包括0.5～2.0mg/mL人血清白蛋白多克隆抗体、2.5～6％海藻糖、3～6％甲醇、0.01mol/L～0.02mol/LPBS缓冲液，且PH为7.2～7.6。

9.根据权利要求6所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的方法，其特征在于，所述步骤S2中，滴2～3滴稀释后的样本到测试卡的加液孔内；所述步骤S3中，显色剂A、溴甲酚绿或溴甲酚紫或双缩脲试剂试剂均滴入1滴，其中，1滴稀释后的样本的体积为30～60μL_，所述溴甲酚绿的PH为4.2，溴甲酚紫的PH为5.2；所述步骤S2中、步骤S3中清洗液均滴入1-2滴，所述清洗液的材料包括0.01～0.02mol/L PBS、0.05％～0.1％Tween-20。

10.根据权利要求9所述的抗体-斑点法进行糖化白蛋白测定的方法，其特征在于，所述步骤S3中的显色剂A的材料包括0.1％～0.3％曙红-5-硫代苯基硼酸三乙基铵盐、0.3％～0.7％氯化铵、0.3％～0.5％脱氧胆酸钠、0.017％～0.025％NaOH，0.03％～0.08％叠氮钠、0.005％～0.03％TritonX-100，且PH为8.5-9.5。