[发明专利]一种HPLC法测定固本延龄丸的方法

权利要求书

1.一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述测定固本延龄丸的方法包括以下步骤：

S1、仪器的准备包括与试剂的准备包括；

S2、溶液的配制，所述溶液的配制包括对照品溶液制备以及样品溶液制备；

S3、检测波长的确定；

S4、系统适用性实验，所述系统适用性实验包括萃取条件的优化、离子强度的影响、萃取时间的确定、洗脱溶剂的种类、解析时间的确定、洗脱溶剂的体积的确定以及摇动速度的确定；

S5、标准曲线与检测限；

S6、精密度实验；

S7、稳定性实验；

S8、加样回收；

S9、样品测定。

2.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述仪器的准备包括：高效液相色谱仪、色谱柱、电子分析天平以及超声波清洗器。

3.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述试剂的准备包括：松果菊苷对照品(纯度≥98％)、毛蕊花糖苷对照品(纯度≥98％)、甲醇为色谱纯、纯净水、乙醇为分析纯、乙腈(色谱纯)、异丙醇、蒸馏水以及四种微萃取薄膜(SiO₂@C18/PA膜，SiO₂@C8/PA膜，PPY/PA膜，PANI/PA膜)实验室合成，四种膜裁剪成2.1cm×1cm尺寸，再将其置于甲醇溶液中解吸10min使附着在表面的杂质洗脱下来。

4.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述对照品溶液制备包括：取毛蕊花糖苷、松果菊苷对照品加甲醇溶解，配成浓度分别1.71mg/ml，1mg/ml的对照品储备溶液，保存在4℃冰箱中。

5.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述样品溶液的制备包括：精密称取固本延龄丸2g置于研钵中，加入10ml色谱甲醇进行研磨，减压抽滤，取续滤液并转移至10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45μm滤膜，取续滤液作为供试品溶液。

6.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述萃取条件的优化，包括离子强度、萃取时间和解吸时间、洗脱溶剂的种类及体积、样品搅拌的速度，每个实验重复三次。在TFME萃取条件的优化实验中毛蕊花糖苷和松果菊苷的浓度分别为17.1μg/ml和20μg/ml。

7.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述离子强度的影响包括向样品溶液中加入盐能否提高或降低TFME的萃取效率，取决于待分析物的化学性质和萃取方法的类型。本实验用不同浓度的NaCl(0％～20％，w/v)来评价离子强度对SiO₂@C18/PA膜吸附毛蕊花糖苷和松果菊苷效果的影响。

8.根据权利要求1所述的一种HPLC法测定固本延龄丸的方法，其特征在于：所述萃取时间的确定了萃取时间在5min～40min范围内，SiO2@C18/PA膜对松果菊苷和毛蕊花糖苷的萃取能力。