[发明专利]一种多肽合成的方法

权利要求书

1.一种多肽合成的方法，其特征在于，其包括如下步骤：

将待合成多肽分为n个片段，n＝4-20，且每个片段包括10-15个氨基酸；

多片段同时合成：在多个树脂上按照Fmoc固相合成策略偶联合成多个片段；

从树脂上将片段切割分离：所述待合成多肽的C端的第1个片段记为第1片段，N端的第n个片段记为第n片段，使得第2片段至第n片段从相应的树脂上切割分离；

羧基的活化：采用羧基活化剂对第2片段至第n片段共n-1个片段同时进行羧基的活化；

脱除偶联有第1片段的树脂上第1片段的Fmoc，得到肽-树脂组合物1；

然后将羧基活化后的第2片段反应到脱除Fmoc的第1片段的树脂上，得到肽-树脂组合物2；

对所述肽-树脂组合物2进行Fmoc脱除，然后将第3片段与所述肽-树脂组合物1混合反应，得到肽-树脂组合物3；

重复进行肽-树脂组合物的Fmoc脱除与新的肽-树脂组合物的合成反应，依次将第4片段-第n片段连接至肽-树脂组合物上；获得目标多肽。

2.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，所述多片段同时合成时所采用的树脂为2-氯三甲苯树脂。

3.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，所述第2片段至第n片段从树脂上将片段切割分离采用的试剂选自TFA/DCM、TFE/DCM、AcOH/TFE/DCM或TFA；

优选地，采用1％的TFA/DCM或1％TFE/DCM从树脂上将第2片段至第n片段切割分离；

优选地，处理30-45min后，旋蒸溶剂。

4.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，所述羧基的活化时所采用的羧基活化剂选自EDC或DCC；

优选地，所述羧基的活化时还包括氨基酸保护剂；

优选地，所述氨基酸保护剂选自HOSU；

优选地，所述树脂、EDC与HOSU的质量比为1:1.1:1.1。

5.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，采用哌啶/DMF脱除树脂上第1片段的Fmoc；

优选地，每0.1mmol偶联有第1片段的树脂与5-10ml的哌啶/DMF混合液反应；

优选地，所述哌啶/DMF混合液中哌啶与DMF的体积比为1:4；

优选地，将偶联有第1片段的树脂与5-10ml的哌啶/DMF混合液反应30-40min。

6.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，采用哌啶/DMF混合液处理所述肽-树脂组合物，从而脱除Fmoc。

7.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，将羧基活化后的第2片段反应到脱除Fmoc的第1片段的树脂上时，还包括加入DIEA。

8.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，重复进行新的肽-树脂组合物的合成反应时，还包括加入DIEA。

9.根据权利要求8所述的多肽合成的方法，其特征在于，将第n片段连接至肽-树脂组合物上后，采用由90％TFA、5％H₂O和5％TIS组成的混合液裂解150-180min获得目标多肽。

10.根据权利要求1所述的多肽合成的方法，其特征在于，将待合成多肽分为n个片段，n＝7-20，且每个片段包括10-15个氨基酸。