[发明专利]一种检测羟考酮纳洛酮缓释片中杂质含量的方法

说明书

本发明提供了一种检测羟考酮纳洛酮缓释片中7,8‑二脱氢纳洛酮杂质含量的方法，所述方法采用超高效液相色谱与质谱联用技术，采用乙酸铵水溶液‑乙腈作为流动相，色谱柱为Waters Acquity CSH C18。该方法专属性好、准确度高、灵敏度高，可以有效监控羟考酮纳洛酮缓释片的质量。

技术领域

本发明涉及羟考酮纳洛酮缓释片杂质含量的检测方法，具体涉及采用液质联用方法检测羟考酮纳洛酮缓释片中7,8-二脱氢纳洛酮含量的方法。

背景技术

羟考酮是一种由生物碱蒂巴因中提取的半合成阿片类药物，其结构类似可待因，通过激动中枢神经系统的阿片μ及κ受体而产生镇痛、镇静作用，用于缓解持续的中度到重度疼痛。羟考酮的镇痛效能和时间与吗啡类似，但生物利用度是吗啡生物利用度的3～4倍，其主要原因为羟考酮在分子结构上－CH₃取代吗啡分子结构的－OH，降低患者口服药物首过效应，提升脂溶性，因此羟考酮透过血－脑脊液屏障及跨膜效果均高于吗啡3倍。盐酸羟考酮缓释片属于口服阿片类镇痛剂，1996年在美国上市出售，该药物集控释和即释于一体，患者服用后，38%药物能够快速得到释放，1h内起到镇痛作用，且药效持久，可持续12h。

阿片类药物通过占领脑和脊椎内的阿片受体来减少疼痛，同时也结合肠道内的周围阿片受体，干扰并延缓胃肠道运动性的肌肉收缩能力，并且还增加肠道水分的吸收、干燥肠道内容物，进一步阻碍食物在消化道内的运输，从而造成便秘。因此，服用阿片类药物的患者往往需要同时服用阿片类药物拮抗剂，如纳洛酮。

纳洛酮本身无内在活性，但能竞争性拮抗各类阿片受体，对μ受体有很强的亲和力。静脉给药时，纳洛酮可逆转阿片类药物导致的呼吸抑制；口服时，纳洛酮生物利用度非常低，仅作用于胃肠道的周围阿片受体，可防止阿片类药物与这些受体结合起到治疗便秘的作用，同时还不会影响阿片类药物的镇痛效果。羟考酮纳洛酮缓释制剂已在欧美上市，其缓解疼痛效果与单一羟考酮缓释制剂相近，但可显著降低阿片类药物引起的便秘。

基因毒性杂质在较低含量就有可能引起DNA 的损伤进而可能引发癌变，对患者的用药安全产生严重危害，所以药物中基因毒性杂质的控制和监测成为药物开发和生产的一个关键问题。7,8-二脱氢纳洛酮（7,8-Didehydronaloxone）为纳洛酮的基因毒性杂质。欧洲药典要求控制其含量在75ppm以下。

7,8-二脱氢纳洛酮

欧洲药典公开了采用HPLC方法检测纳洛酮原料药中7,8-二脱氢纳洛酮的含量。但是目前尚无报道制剂中，尤其是羟考酮纳洛酮缓释片中7,8-二脱氢纳洛酮含量检测方法。由于羟考酮纳洛酮缓释片中含有多种活性成分和多种辅料，并且7,8-二脱氢纳洛酮杂质含量很低，常规方法难以准确地检测该复方缓释制剂中7,8-二脱氢纳洛酮的含量。

发明内容

本发明提供了一种检测羟考酮纳洛酮缓释片中7,8-二脱氢纳洛酮含量的方法，专属性好、准确度高、灵敏度高，可有效监控羟考酮纳洛酮缓释片的质量，提高药物安全性。

本发明采用的技术方案如下。

本发明采用超高效液相色谱与质谱联用技术，超高效液相色谱采用乙酸铵水溶液-乙腈作为流动相；色谱柱为C18 Waters Acquity CSH C18。

在本发明的一个方面中，所述流动相采用梯度洗脱，梯度条件如下：

也即是采用以下梯度洗脱程序：

初始梯度：流动相A : 流动相B为98:2；

0min至4min，流动相A : 流动相B由98:2渐变为75:25；

4.0min至6.5min，流动相A : 流动相B由75:25渐变为30:70；