[发明专利]一种灰肉色链霉菌0728-09及其应用

说明书

本发明提供一种高效抑藻活性的灰肉色链霉菌0728‑09及其应用，所述的灰肉色链霉菌0728‑09由防城港海水中分离纯化获得原始菌株。经中国普通微生物菌种保藏管理中心鉴定，分类命名为灰肉色链霉菌，保藏编号为CGMCC No.25117。本发明的灰肉色链霉菌0728‑09经优化后的培养基发酵培养后获得大量具有抑藻活性的菌液。本发明的灰肉色链霉菌0728‑09是高效抑藻微生物，具有较大的应用价值。

技术领域

本发明涉及环境治理微生物领域，具体涉及一种灰肉色链霉菌0728-09及其应用。

背景技术

随着全球水体富营养化程度的加剧，有害藻类水华的暴发频率越来越高，且影响范围变大，其对环境和经济造成很大影响，其中，球形棕囊藻也是引起水华的一种主要藻类。该藻球形群体外围具有一层柔软的胶质被且藻体含多糖，当大量繁殖形成赤潮时，含胶质和糖的藻体便紧紧贴在鱼鳃上。影响鱼的呼吸和摄食，致使鱼类窒息，缺氧而死亡。其次，该藻巨大的生物量(尤其是黎明和傍晚时)可造成水体缺氧导致灾害。再加上藻体和藻细胞死亡腐烂后会产生溶血毒素等有毒物质，对水体环境的破坏将持续一定时间，严重时会导致鱼类大面积死亡，尤其对网箱养殖和对虾育苗危害更大。

目前，许多方法被用于防治藻类水华，诸如排水改道、曝气循环、化学抑藻、生物去除等方法。排水改道、曝气循环处理等方法成本高，化学抑藻容易造成二次污染，而生物方法除藻是利用藻类的天敌及其代谢产生的物质对藻类的生长、繁殖进行抑制，从而达到抑制藻类数量、改善水体质量的方法，其中通过抑藻真菌来抑藻是目前的研究热点之一。该方法一般从暴发水华的水体中分离、富集抑藻真菌，其优势是安全、环保。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灰色链霉菌0728-09及其应用。

本发明第一目的在于提供一种自主筛选的具有高抑藻活性的灰色链霉菌0728-09，分类命名为灰肉色链霉菌Streptomycesgriseoincarnatus，该菌株已于2022年6月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25117，保藏地址：中国北京。

本发明所述的灰肉色链霉菌0728-09是从防城港海水中分离纯化获得的原始菌株，所述灰肉色链霉菌0728-09的筛选方法包括以下步骤：

(1)取防城港区域海水，采用无菌水对海水进行梯度稀释：10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶，每个梯度稀释液取0.1ml涂布在固体培养基上，30℃培养5-7天。

(2)挑取不同菌落，划线于固体培养基上，置于30℃培养3-5天。观察分离菌落是否纯化。若有杂菌，重复该步骤直至纯培养。

(3)将上述纯化后的菌株接种于液体培养基中，50-100rpm，30℃振荡培养3-5天。

(4)取1ml上述菌液接种于20ml指数生长的无菌球形棕囊藻培养液中，于20±1℃，12h光照,12h黑暗，2400lux光照强度条件下，培养2天，液体培养基为对照加入藻液中，分别设置3个平行，检测叶绿素a含量，判断藻细胞的数量，从而筛选出有抑藻活性最强菌株为灰肉色链霉菌0728-09。

根据本发明实施方案，所述固体培养基组分包括：硝酸钾：1.0g，磷酸氢二钾：0.5g，硫酸镁：0.5g，氯化钠：0.5g，硫酸亚铁：0.01g，可溶性淀粉：20.0g，琼脂：15.0g，纯化水1000ml。

根据本发明实施方案，所述液体培养基组分包括：硝酸钾：1.0g，磷酸氢二钾：0.5g，硫酸镁：0.5g，氯化钠：0.5g，硫酸亚铁：0.01g，可溶性淀粉：20.0g，纯化水1000ml。