[发明专利]一种灰肉色链霉菌0728-09及其应用

权利要求书

1.一种灰肉色链霉菌0728-09，其特征在于：分类命名为灰肉色链霉菌Streptomyces griseoincarnatus ，该菌株已于2022年6月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25117。

2.如权利要求1所述灰肉色链霉菌0728-09的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取防城港区域海水，采用无菌水对海水进行梯度稀释：10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶，每个梯度稀释液取0.1ml涂布在固体培养基上，30℃培养5-7天；

（2）挑取不同菌落，划线于固体培养基上，置于30℃培养3-5天；观察分离菌落是否纯化；若有杂菌，重复该步骤直至纯培养；

（3）将上述纯化后的菌株接种于液体培养基中，50-100rpm，30℃振荡培养3-5天；

（4）取1ml上述菌液接种于20ml指数生长的无菌球形棕囊藻培养液中，于20±1℃，12h光照，12h黑暗，2400lux光照强度条件下，培养2天，液体培养基为对照加入藻液中，分别设置3个平行，检测叶绿素a含量，判断藻细胞的数量，从而筛选出有抑藻活性最强菌株为灰肉色链霉菌0728-09。

3.如权利要求2所述的筛选方法，其特征在于，所述固体培养基组分包括：硝酸钾：1.0g，磷酸氢二钾：0.5g，硫酸镁：0.5g，氯化钠：0.5g，硫酸亚铁：0.01g，可溶性淀粉：20.0g，琼脂：15.0g，纯化水1000ml。

4.如权利要求2所述的筛选方法，其特征在于，所述液体培养基组分包括：硝酸钾：1.0g，磷酸氢二钾：0.5g，硫酸镁：0.5g，氯化钠：0.5g，硫酸亚铁：0.01g，可溶性淀粉：20.0g，纯化水1000ml。

5.权利要求1所述的灰肉色链霉菌0728-09在球形棕囊藻治理中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，将灰肉色链霉菌0728-09进行发酵培养得到灰肉色链霉菌菌液，并将所述菌液应用于球形棕囊藻治理。

7.一种制备权利要求6所述灰肉色链霉菌菌液的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将灰肉色链霉菌接入固体斜面培养基中进行活化，培养温度为30-37℃，静置培养2-4d；活化后的固体平板菌株接入一级种子培养基中，进行一级种子扩大培养，培养温度为30-37℃，转速100-200rpm，培养3-7d；按1-5％的接种量将一级种子液接入发酵培养基进行扩大培养，培养温度为30-37℃，转速50-100rpm，培养3-7d，收集菌液备用。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述固体平板培养基中的组分包括：可溶性淀粉1-3%、琼脂粉1-2%、硝酸钾0.05-0.2%、磷酸氢二钾0.025-0.075%、硫酸镁0.025-0.075%、氯化钠0.025-0.075%、硫酸亚铁0.0005-0.0015%；优选为可溶性淀粉2%、琼脂粉1.5%、硝酸钾0.1%、磷酸氢二钾0.05%、硫酸镁0.05%、氯化钠0.05%、硫酸亚铁0.001%；优选为可溶性淀粉2%、琼脂粉1.5%、硝酸钾0.1%、磷酸氢二钾0.05%、硫酸镁0.05%、氯化钠0.05%、硫酸亚铁0.001%。

9.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述一级种子培养基中的组分包括：可溶性淀粉1-3%、硝酸钾0.05-0.2%、磷酸氢二钾0.025-0.075%、硫酸镁0.025-0.075%、氯化钠0.025-0.075%、硫酸亚铁0.0005-0.0015%；优选为可溶性淀粉1.5%、硝酸钾0.1%、磷酸氢二钾0.05%、硫酸镁0.05%、氯化钠0.05%、硫酸亚铁0.001%。

10.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述发酵培养基中的组分包括：可溶性淀粉1-3%、硝酸钾0.05-0.2%、磷酸氢二钾0.025-0.01%、硫酸镁0.025-0.075%、氯化钠0.025-0.075%、硫酸亚铁0.0005-0.003%；优选为可溶性淀粉2%、硝酸钾0.1%、磷酸氢二钾0.06%、硫酸镁0.05%、氯化钠0.05%、硫酸亚铁0.0012%。