[发明专利]用于检测牛结节皮肤病病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒和鹿痘病毒基因引物组合物及应用

说明书

本发明公开了一种同时检测反刍动物痘病毒的LAMP引物组合、试剂盒和检测方法。该发明属于生物技术领域。包括以下引物：外引物F3和B3，内引物FIP和BIP，环引物LF和LB。该引物组合物可用于检测反刍动物痘病毒属病毒，能够一次且高效地检测待检样本中是否携带牛结节皮肤病病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒和鹿痘病毒。并且该引物组合具有特异性好、灵敏度高、用时短、稳定等特点。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种用于检测牛结节皮肤病病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒和鹿痘病毒基因的引物组合物及应用。

背景技术

山羊痘病毒(Goatpox Virus，GTPV)、绵羊痘病毒(Sheeppox Virus，SPPV)、牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease Virus，LSDV)和鹿痘病毒(Deerpox virus)属于羊痘病毒属病毒(Capripoxvirus，CPV)，能分别引起山羊、绵羊、牛和鹿的皮肤、器官表面广泛性结节和水肿，病畜产乳量急剧减少，皮毛品质极大下降，造成巨大经济损失。

牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease，LSD)，又称牛结节疹、牛结节性皮炎或牛疙瘩皮肤病。病原是痘病毒科脊椎动物痘病毒亚科山羊痘病毒属的牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus，LSDV)，该病的临床特征包括发热，皮肤、粘膜和内脏器官出现结节，机体消瘦，淋巴结肿大，皮肤水肿，部分病例会死亡。该病起产奶量下降，公牛暂时或永久性不育，损坏皮张，甚至因为继发感染而死亡，造成严重经济损失。

绵羊痘病毒引起绵羊痘，具有高度接触传染性，是家畜中最严重的一种痘病。其特征是在全身皮肤，特别是身体无毛部分出现典型的痘疮，有时也发生于粘膜。病羊发热，并有较高死亡率，经常引起严重的经济损失。绵羊痘发生于全世界许多地区，有些国家，例如英国、荷兰等消灭了羊痘。山羊痘病毒引起山羊痘，鹿痘病毒引起有时也使绵羊和鹿发病，症状与绵羊痘相似。

传统的上述病毒属检测方法主要是血清学检测、间接免疫荧光和蛋白印迹试验等)和病原学检测(PCR、实时荧光定量PCR和高分辨率熔曲线分析法等)。我国目前最常用检测方法为荧光定量PCR，该检测方法灵敏度和特异性较好，但操作复杂，仪器昂贵，难以在基层实际生产中普及应用。我们发明高通量检测上述四个病毒检测方法，检测效率更高，更便捷。

发明内容

本发明提供一种用于检测牛结节皮肤病病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒和鹿痘病毒基因的引物组合物及应用病原的引物组和物及其应用。具体通过以下技术方案实现：

所述用于检测检测牛结节皮肤病病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒和鹿痘病毒基因的引物组合物及应用的引物组合物，其特征在于，包括以下引物：

第一组