[发明专利]与大豆株高主效基因位点紧密连锁的分子标记及用途有效
| 申请号: | 202211348754.7 | 申请日: | 2022-10-31 |
| 公开(公告)号: | CN116024368B | 公开(公告)日: | 2023-08-18 |
| 发明(设计)人: | 李玉秋;刘晓冬;王英男;齐广勋;董岭超;董英山;夏正俊;王玉民;赵洪锟;袁翠平 | 申请(专利权)人: | 吉林省农业科学院 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11;C12Q1/6869 |
| 代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 庄华红 |
| 地址: | 130124 吉林省长*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 大豆 株高主效 基因 紧密 连锁 分子 标记 用途 | ||
1.一种与大豆株高主效基因位点紧密连锁的分子标记片段,其特征在于,所述主效基因位点位于7号染色体36170131-36245158之间,命名为qPH07-1;所述分子标记片段为Gm07_36170131_A_G或Gm07_36245158_T_C,所述qPH07-1定位在分子标记片段Gm07_36170131_A_G和Gm07_36245158_T_C之间的72.1kb区间内;
所述Gm07_36170131_A_G的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示或SEQ ID NO:2所示;
所述Gm07_36245158_T_C的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示或SEQ ID NO:4所示。
2.一种权利要求1所述的分子标记片段在大豆株高性状选育中的用途。
3.一种大豆株高性状选育的方法,其特征在于,包括以下步骤:
以母本长农16及父本吉林茶里花杂交产生的F2代群体的基因组DNA为模板,权利要求1所述分子标记片段的扩增引物为引物,进行PCR扩增;
分别将Gm07_36170131_A_G-F/R扩增产物和Gm07_36245158_T_C-F/R扩增产物进行测序分析,当F2代群体中存在分子标记片段Gm07_36170131_A_G,且当Gm07_36170131_A_G扩增产物自5’端第39位在母本长农16中为A,植株矮,或者F2代群体中存在分子标记片段Gm07_36245158_T_C,且Gm07_36245158_T_C扩增产物自5’端第30位在母本长农16中为T,植株矮;或者当F2代群体中存在分子标记片段Gm07_36170131_A_G,且当Gm07_36170131_A_G扩增产物自5’端第39位在父本吉林菜里花中为G,植株高;或者F2代群体中存在分子标记片段Gm07_36245158_T_C,且Gm07_36245158_T_C扩增产物自5’端第30位在父本吉林菜里花中为C,植株高;
其中,分子标记片段Gm07_36170131_A_G的正向引物序列如SEQ ID NO:5所示;反向引物序列如SEQ ID NO:6所示;
分子标记片段Gm07_36245158_T_C的正向引物序列如SEQ ID NO:7所示;反向引物序列如SEQ ID NO:8所示。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,PCR扩增反应体系为:20ng/μl DNA 4μl,rTaq酶0.5μl,3×GC Buffer Ⅰ 15μl,2.5mM dNTPs 2.5μl,2μM正反向引物各2.5μl,ddH2O补足到30μl。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR反应程序为:先94℃ 5min,然后94℃30s,58℃ 40s,72℃ 70s,扩增35个循环,最后72℃延伸10min,4℃保温。
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