[发明专利]高通量血清全谱维生素检测仪器及检测方法

权利要求书

1.高通量血清全谱维生素检测仪器，其特征在于：包括泵、自动进样器、预柱、色谱柱、四通阀、质谱仪及废液瓶。

2.高通量血清全谱维生素检测仪器使用方法，其特征在于：使用权利要求1所述的检测仪器，包括如下步骤：

S1、泵1运行低比例有机相，样品经自动进样器进样，进入预柱，水溶性维生素流出预柱，经四通阀进入色谱柱1，脂溶维生素停留在预柱上，泵1运行的同时泵2运行，流动相为脂溶维生素流动相初始比例，冲洗平衡色谱柱2；

S2、水溶维生素进入色谱柱1，四通阀1切换，泵2运行水溶维生素流动相梯度，水溶性维生素进行分离检测，四通阀1切换后，泵1变为高比例有机相，将预柱上的脂溶性维生素洗脱至色谱柱2；

S3、水溶性维生素检测结束后，四通阀1和四通阀2切换，泵2运行脂溶性维生素流动相梯度，脂溶维生素进行分离检测，泵1运行低比例有机相，冲洗预柱及色谱柱1。

3.高通量血清全谱维生素检测前处理方法，其特征在于：使用权利要求1所述的检测仪器，包括如下步骤：

步骤一、移取200μL血清样本于1.5mL离心管，加入600μL含内标的乙腈溶液(含抗氧化剂)，涡旋震荡5min，后置于台式高速冷冻离心机内，在4℃条件下以13000rpm离心10min；

步骤二、离心结束后，吸取全部上层澄清溶液于另一1.5mL离心管，冻干；

步骤三、冻干结束后，100μL甲醇复溶，振荡5min，在4℃条件下以13000rpm离心10min，移取上清液，上机分析。

4.高通量血清全谱维生素检测方法，其特征在于：使用经过所述前处理方法制得的样本进行检测。

5.根据权利要求4所述的高通量血清全谱维生素检测方法，其特征在于：所述检测方法为用于同时检测脂溶性维生素和水溶性维生素的全谱维生素检测方法。

6.根据权利要求5所述的高通量血清全谱维生素检测方法，其特征在于：所述水溶性维生素使用ACQUITY UPLC HSS T3 2.1×100mm×1.8μm的色谱柱进行检测，所述水溶性维生素检测所使用的流动相A为0.1％甲酸/水溶液，所述水溶性维生素检测所使用的流动相B为甲醇；

所述脂溶性维生素使用Ultimate XB-C8 3.0×50mm 3.0μm的色谱柱进行检测，所述脂溶性维生素检测所使用的流动相A为0.1％甲酸/水溶液，所述脂溶性维生素检测所使用的流动相B为为0.2％甲酸/甲醇。

7.根据权利要求6所述的高通量血清全谱维生素检测方法，其特征在于：所述水溶性维生素检测的流速为0.4mL/min，所述水溶性维生素检测的进样量为10μL，所述水溶性维生素检测的柱温为40℃；

所述脂溶性维生素检测的流速为0.6mL/min，所述脂溶性维生素检测的进样量为15μL，所述脂溶性维生素检测的柱温为40℃。

8.根据权利要求4所述的高通量血清全谱维生素检测方法，其特征在于：质谱条件为：ECI离子源，正离子模式，Capillary为3V，Desolvation Temp为550℃，Desolvation为1000L/hr，Cone为150L/hr。