[发明专利]乙嘧酚半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用在审
| 申请号： | 202210866370.8 | 申请日： | 2022-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN114989098A | 公开（公告）日： | 2022-09-02 |
| 发明（设计）人： | 金茂俊;类兴梅;许灵媛;赵静;王静;曹振;金芬;佘永新;郑鹭飞;邵华;王珊珊;王淼 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
| 主分类号： | C07D239/47 | 分类号： | C07D239/47;C07D403/12;C07K14/765;C07K14/77;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/577 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 霍苗 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乙嘧酚 半抗原 完全 抗原 抗体 制备 方法 应用 | ||
1.一种乙嘧酚半抗原，具有式I所示结构：
所述式I中的R1为能够与载体蛋白直接偶联的活性基团。
2.根据权利要求1所述的乙嘧酚半抗原，其特征在于，所述R1包括-(CH2)n-COOH、-(CH2)n-NH2、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-COOR2、n为0～3的整数，m为0～4的整数，所述-(CH2)n-COOR2或中的R2包括
3.根据权利要求1或2所述的乙嘧酚半抗原，其特征在于，所述乙嘧酚半抗原具有式I-1或式I-2所示结构：
4.权利要求1～3任意一项所述的乙嘧酚半抗原的制备方法，包括以下步骤：
将式II所示结构的化合物结构中的R3基团通过化学反应替换为R1基团，得到所述式I所示结构的乙嘧酚半抗原；
所述式II中的R3为-CH3或-COO-CH2-CH3。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述式I-1所示结构的乙嘧酚半抗原的制备方法包括以下步骤：
将式5所示结构的化合物、无机强碱溶解于有机溶剂和水的混合溶液中进行水解反应，得到式I-1所示结构的乙嘧酚半抗原；
6.一种乙嘧酚完全抗原，由权利要求1～3任意一项所述乙嘧酚半抗原或权利要求4或5所述的制备方法制备得到的乙嘧酚半抗原与载体蛋白偶联得到。
7.一种乙嘧酚抗体，其特征在于，将权利要求6所述乙嘧酚完全抗原乳化后免疫宿主动物得到。
8.权利要求7所述乙嘧酚抗体的制备方法，包括以下步骤：
将权利要求6所述乙嘧酚完全抗原乳化后免疫宿主动物；
乙嘧酚多克隆抗体的制备方法为：将免疫宿主动物加强免疫后，采集免疫动物血液后分离，得到所述乙嘧酚多克隆抗体；
乙嘧酚单克隆抗体的制备方法为：提取免疫宿主动物的脾细胞，将所述脾细胞与SP2/0瘤细胞融合，筛选能够分泌乙嘧酚抗体的单克隆杂交瘤细胞株，基于所述单克隆杂交瘤细胞株制备所述乙嘧酚单克隆抗体；
乙嘧酚纳米抗体的制备方法为：提取免疫宿主动物血液中的B淋巴细胞转录的mRNA，反转录为cDNA，以所述cDNA为底物PCR扩增获取多样化纳米抗体基因片段，将所述多样化纳米抗体基因片段构建噬菌体或酵母抗体表达库，经筛选得到乙嘧酚纳米抗体。
9.一种检测乙嘧酚的试剂或试剂盒，含有权利要求7所述乙嘧酚抗体或者权利要求8所述制备方法制备得到的乙嘧酚抗体。
10.权利要求7所述乙嘧酚抗体或者权利要求8所述制备方法制备得到的乙嘧酚抗体或者权利要求9所述的试剂或试剂盒在检测乙嘧酚中的应用。
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