[发明专利]一种心脏靶向载药外泌体及应用和治疗心脏疾病的药物

权利要求书

1.一种心脏组织靶向外泌体，其特征在于，所述靶向外泌体来源于小肠部位的细胞；

优选地，所述细胞选自正常细胞或其衍生株、癌细胞；

优选地，所述细胞来源于人或非人类哺乳动物；

优选地，所述非人类哺乳动物包括非人灵长类动物、啮齿动物、牛、猪、羊、犬、兔、猫、马；

优选地，所述啮齿动物包括小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠。

2.根据权利要求1所述的靶向外泌体，其特征在于，所述小肠部位的细胞包括小肠细胞、小肠癌细胞、诱导多能干细胞诱导的小肠细胞；

优选地，小肠细胞包括小肠组织上皮细胞如FHs 74lnt、INT407、MODE-K、PEC-J2、CEIEC，小肠粘膜上皮细胞，小肠隐窝上皮细胞，小肠内皮细胞，小肠内分泌细胞如STC-1，小肠平滑肌细胞，小肠成纤维细胞如RSIFC；小肠癌细胞包括HIC-2细胞。

3.权利要求1或2所述的靶向外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)培养细胞，获取细胞培养液；

2)离心，取上清液；

3)二次离心，取上清液；

4)再次离心，缓冲液重悬沉淀获得靶向外泌体；

优选地，其特征在于，步骤2)离心条件为2000g离心10min；

优选地，步骤3)离心条件为10000g离心30min；

优选地，步骤4)离心条件为100000g离心2h；

优选地，步骤4)所述的缓冲液为PBS；

优选地，所述细胞选自小肠部位的细胞。

4.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1或2所述的靶向外泌体；和治疗剂/预防剂；

优选地，所述治疗剂或预防剂包括小分子化学药物、肽类或蛋白质药物、抗体、酶、细胞因子、激素、抗生素、疫苗和/或核酸类药物；

优选地，所述核酸类药物包括质粒DNA、mRNA、microRNA、小干扰RNA、shRNA、有义RNA、反义寡核苷酸、适配体；

优选地，所述肽类或蛋白质药物包括LDL受体；

优选地，所述细胞因子包括TPO、EPO、tPA、MyOD、血管内皮生长因子和碱性成纤维内皮细胞生长因子；

优选地，细胞因子包括血管内皮生长因子；

优选地，所述血管内皮生长因子选自VEGF；

优选地，所述治疗剂/预防剂用于治疗或预防心脏疾病；

优选地，所述心脏疾病包括心力衰竭、心肌病、心肌炎、冠心病、心脏肿瘤、感染性心内膜炎；

优选地，所述心脏疾病选自冠心病。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物通过将治疗剂或预防剂导入到靶向外泌体中获得；

优选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体。

6.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括权利要求1或2所述的靶向外泌体，和检测标记；

优选地，所述检测标记包括荧光蛋白、生物素、酶、标签、放射性核素、发光标记或可以通过NMR或ESR光谱法检测的化合物。

7.载药心脏组织靶向外泌体的制备方法，其特征在于，包括：

将用于治疗心脏疾病的药物和权利要求1或2所述的靶向性的外泌体放入电转杯中进行电转，将电转产物离心去除游离的药物，得到纯化后靶向载药外泌体；优选地，电转使用的电压选自50-300V；

优选地，电转使用的电压为250V。

8.权利要求1或2所述的靶向外泌体在靶向心脏组织中的应用。

9.权利要求1或2所述的靶向外泌体或权利要求4-5任一项所述的药物组合物在制备治疗心脏疾病的药物中的应用；

优选地，所述心脏疾病包括心力衰竭、心肌病、心肌炎、冠心病、心脏肿瘤、感染性心内膜炎；

优选地，所述心脏疾病选自冠心病。

10.权利要求1或2所述的靶向外泌体或权利要求6所述的组合物在制备检测心脏疾病的产品中的应用；

优选地，所述心脏疾病包括心力衰竭、心肌病、心肌炎、冠心病、心脏肿瘤、感染性心内膜炎；

优选地，所述心脏疾病选自冠心病。