[发明专利]一种尖孢镰刀菌株及其同步降解糖化发酵甘蔗渣产乙醇的方法在审
| 申请号: | 202210684900.7 | 申请日: | 2022-06-17 |
| 公开(公告)号: | CN115975812A | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
| 发明(设计)人: | 曾璐;秦丹;熊兴耀;谢丙炎;苏小军;张志旭;胡亚平;湛佳佳;周泉 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P7/10;C12R1/77 |
| 代理公司: | 北京卓岚智财知识产权代理有限公司 11624 | 代理人: | 沈煜华 |
| 地址: | 410128 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 镰刀 菌株 及其 同步 降解 糖化 发酵 甘蔗渣 乙醇 方法 | ||
1.一种尖孢镰刀菌株,其特征在于:所述菌株是以甘蔗渣为底物,通过同步糖化发酵,筛选得到对纤维素降解能力较强,产乙醇能力较高的尖孢镰刀菌菌株,所述尖孢镰刀菌菌株于2017年10月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC),分类命名为尖孢镰刀菌(Fusarium Oxysporum),保藏编号为GDMCC3632。
2.一种尖孢镰刀菌株同步降解糖化发酵甘蔗渣产乙醇的方法,其特征在于,包含以下步骤:
S1.制备甘蔗渣:甘蔗渣经过自然风干后,粉碎,过100目筛,最后置于80℃烘箱烘干至恒重,密封保存备用;
S2.甘蔗渣通过甘油-过碳酸钠(SPG)预处理:称取步骤S1制备的甘蔗渣,添加含70~80%甘油和10~12%过碳酸钠的过碳酸钠-甘油水溶液与甘蔗渣混合,甘蔗渣与过碳酸钠-甘油水溶液比例为1∶10(w/v),在121℃下条件下反应30~40min,待反应结束后,用布氏漏斗抽滤,并用90℃的去离子水洗至固体样品pH=7,于70~80℃烘箱烘至恒重,粉碎,得到经SPG处理的甘蔗渣,密封保存备用;
S3.制备种子液:在PDA平板上接种尖孢镰刀菌菌丝,培养7天,然后将与平皿同等大小的滤纸覆盖于平皿上,待菌丝长满滤纸,在超净工作台中挑取2cm2滤纸上的菌丝接到PDB培养基中,在25~28℃,130~150r/min条件下摇床震荡培养40~48h,即得种子液;
S4.制备发酵液:硫酸铵1Kg,磷酸二氢钾1Kg,七水硫酸镁0.5Kg,氯化钙1Kg,用8L的蒸馏水溶解后,定容至10L,得到无机盐营养液,称取步骤S2经SPG处理的甘蔗渣5Kg,加入无机盐营养液定容至5L,配制成甘蔗渣含量为10%的发酵液,于121℃,20~30min高压灭菌后备用;
S5.发酵:向步骤S4经高压灭菌发酵液中接种步骤S3活化后的尖孢镰刀菌种子液5~10mL,混匀后在25~30℃,150~300r/min条件下培养3~7天。
3.权利要求2所述一种尖孢镰刀菌株同步糖化发酵甘蔗渣产乙醇的方法,其特征在于:步骤S5所述尖孢镰刀菌种子液中尖孢镰刀菌浓度为1×106~1×107CFU/mL。
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