[发明专利]一种抗Flag标签的抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种抗Flag标签的抗体，其包括重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3或其变体的重链，以及轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3或其变体的轻链；所述重链CDR1，其包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；所述重链CDR2，其包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；所述重链CDR3，其包括SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；所述轻链CDR1，其包括SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；所述轻链CDR2，其包括SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；所述轻链CDR3，其包括SEQ ID NO:6所示的序列。该重组单克隆抗Flag标签的抗体与标签蛋白的亲和力达到5.219E‑10，纯化后的抗Flag标签单抗活性高，具有极大地应用潜力。

技术领域

本发明属于分子免疫学领域，更具体地，涉及一种抗Flag标签的抗体及其应用。

背景技术

Flag是由8个氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的短肽，专门设计用于融合蛋白质的免疫吸附纯化。利用Flag标签可以建立一个基于融合多肽的高效检测和纯化系统。Flag标签结构短小，且与融合蛋白质之间含有一个肠激酶切割位点，可以通过肠激酶切割除去。

Flag抗原标签技术具有简单、方便的优点。但是，目前商品化抗Flag 标签蛋白的单克隆抗体种类不多，且多需从国外进口，价格十分昂贵。因此，研制一种新的抗Flag单克隆抗体，在融合蛋白质的免疫吸附分离纯化中具有广阔的应用前景。

发明内容

针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种抗Flag标签的抗体及其应用，其目的在于通过Flag抗原刺激小鼠，在其体内发现一种高效价的Flag抗体，并通过该抗体可变区基因克隆及测序，获得该抗体重链和轻链的氨基酸序列，以此为基础制备重组单克隆Flag抗体，由此解决现有Flag抗体种类少、价格昂贵的技术问题。

为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种抗Flag标签的抗体，其包括重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3或其变体的重链，以及轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3或其变体的轻链；

所述重链CDR1，其包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列T-Y-T-I-H；所述重链CDR2，其包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列Y-I-N-P-S-S-G-Y-A-A-Y-N-Q-N-F-K-D；所述重链CDR3，其包括SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列E-K-F-Y-G-Y-D-Y；

所述轻链CDR1，其包括SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列 R-S-S-Q-S-I-V-H-R-N-G-N-T-Y-L-E；所述轻链CDR2，其包括SEQ ID NO:5 所示的氨基酸序列K-V-S-N-R-F-S；所述轻链CDR3，其包括SEQ ID NO:6 所示的序列F-Q-G-S-H-V-P-Y-T。

优选地，所述抗Flag标签的抗体，其所述变体重链，其重链可变区包括任意一个与SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，或者与SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变；所述变体的轻链，其轻链可变区包括任意一个与SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，或者与SEQID NO:8 所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变。

优选地，所述抗Flag标签的抗体，其所述变体重链，其重链可变区包括任意一个与SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，或者与SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列相比具有10个以内氨基酸突变；所述变体的轻链，其轻链可变区包括任意一个与SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，或者与SEQ IDNO:8所示的氨基酸序列相比具有10个以内氨基酸突变。

优选地，所述抗Flag标签的抗体，其所述氨基酸突变为保守突变，优选置换、插入或缺失的氨基酸序列。