[发明专利]油菜BnaBPA03基因及其调控油菜株型的应用及方法

说明书

本发明属于植物基因工程和植物育种技术领域，具体涉及一种油菜BnaBPA03基因及其调控油菜株型的应用及方法。本发明首先克隆了BnaBPA03基因，构建该基因的过表达载体pK7FWG2.0‑BnaBPA03，转化甘蓝型油菜，在油菜中获得了过表达的稳定转化株系，得到分枝角度小、株型紧凑的转基因植株，本发明所获得的转化株，分枝角度更小，叶角也更小，所获得的株型结构更加紧凑；本发明对油菜等经济作物的生产育种具有重要的指导借鉴意义，为改良油菜株型，实现油菜的高密度种植提供了一定的可利用种质资源。

技术领域

本发明属于植物基因工程和植物育种技术领域，具体涉及一种油菜BnaBPA03基因及其调控油菜株型的应用方法及方法。

背景技术

油菜(Brassica napus L.)是重要的油料作物，是食用植物油和生物燃油的重要来源，也可用作观赏，具有广阔的市场前景。随着人口的增长和对可再生能源需求的增加，市场对菜籽油的需求不断增长，我国油菜产业存在巨大的供需缺口并严重依赖进口。因此，提高油菜产量，提高菜籽油的自给率对于保障我国植物油供给安全具有极其重要的战略意义，油菜的高产育种已成为油菜育种的首要目标。

株型的改良有助于提高作物产量，油菜的分枝角度是决定作物株型的重要因素。分枝角度指的是有效分枝与主茎形成的夹角，是影响油菜产量的重要株型性状。有研究表明，适度紧凑的株型有利于油菜中下部的通风透光、降低病虫害、提高群体光能利用率、提高叶面积系数和抗倒伏性，并且可以适度提高播种密度，对于作物合理密植、提高产量及机械化收获有重要意义。迄今为止，关于分枝角度的研究在拟南芥(分枝角度)、水稻(分蘖角度)、玉米(茎叶夹角)中已有较多研究，并对相关基因进行了克隆和鉴定，但在油菜上的研究较少且尚处于定位阶段，相关基因的克隆及功能分析鲜有报道，仍有待进一步发掘。

发明内容

针对现有技术中存在的一些不足，本发明提供了甘蓝型油菜BnaBPA03基因及其在改善油菜株型中的应用方法及方法。在本发明中，对BnaBPA03基因进行克隆，将其在油菜中过表达后，获得一种株型紧凑的转基因株系。

为达到上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明首先提供一种调控油菜株型的BnaBPA03基因，所述BnaBPA03基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。

本发明还提供一种重组表达载体pK7FWG2.0-BnaBPA03，所述重组表达载体包括所述基因的核苷酸序列、35S启动子以及eGFP增强型绿色荧光蛋白。

本发明还提供一种重组工程菌，所述菌包括所述的重组表达载体。

本发明还提供一种调控油菜株型的方法，所述方法通过对BnaBPA03基因的过表达来调控油菜株型；所述调控为调控油菜的分枝角度、株高、分枝数量或叶角大小。

进一步的，所述方法包括如下步骤：

根据BnaBPA03基因设计特异引物，扩增包含BnaBPA03基因的cDNA序列，使用Gateway方法构建出重组表达载体pK7FWG2.0-BnaBPA03；进一步的，采用Gateway的方法将BnaBPA03基因序列与携带35S启动子和eGFP的植物表达载体pK7FWG2.0上的ccdb基因发生交换，最终形成pK7FWG2.0-BnaBPA03重组载体；

将重组表达载体pK7FWG2.0-BnaBPA03转化受体菌，得到重组工程菌；其中，所述受体菌为农杆菌GV3101；

将得到的重组工程菌扩大培养，菌液转化油菜下胚轴；

油菜下胚轴愈伤组织培养、诱导再分化，得到油菜转化株。

本发明还提供所述的BnaBPA03基因在调控油菜株型中的应用。