[发明专利]一种检测PCM1-JAK2融合基因的多重PCR方法、引物探针组合与试剂盒

权利要求书

1.一种检测PCM1-JAK2融合基因的引物探针组合，其特征在于，所述引物探针组合包括引物探针组合A1和引物探针组合A2：

所述引物探针组合A1包括上游引物PCM1-E23-F、PCM1-E26-F、PCM1-E28-F、PCM1-E30-F、PCM1-E36-F、下游引物JAK2-E9-R、JAK2-E12-R和探针JAK2-E9-Probe、JAK2-E12-Probe，其碱基序列如下所示：

PCM1-E23-F：CCAGCCTGGCATCTAAAGATA

PCM1-E26-F：CTAGTGAGAGCCTTGCTACTAC

PCM1-E28-F：CTGGTGCAGGTACTACAGTT

PCM1-E30-F：TGATGAGAGCAAAGAGTTTGTAAAG

PCM1-E36-F：GCTGGAAGTCCTGATACTGA

JAK2-E9-R：ATGTGCATCTGCAGTTAATCTATAA

JAK2-E12-R：TGTTGGTGAGGTTGGTACATC

JAK2-E9-Probe：FAM-CCATCAATTAATGACACGAAAGACA-MGB

JAK2-E12-Probe：HEX-ACACCATTCGTTCTGAAGACTAGA-MGB

所述引物探针组合A2包括上游引物PCM1-E23-F、PCM1-E26-F、PCM1-E28-F、PCM1-E30-F、PCM1-E36-F、下游引物JAK2-E11-R和探针JAK2-E11-Probe，其碱基序列如下所示：

PCM1-E23-F：CCAGCCTGGCATCTAAAGATA

PCM1-E26-F：CTAGTGAGAGCCTTGCTACTAC

PCM1-E28-F：CTGGTGCAGGTACTACAGTT

PCM1-E30-F：TGATGAGAGCAAAGAGTTTGTAAAG

PCM1-E36-F：GCTGGAAGTCCTGATACTGA

JAK2-E11-R：GAACAGTTTCCATCTGGTAACAAT

JAK2-E11-Probe：JOE-CACTGAGGTTGTACTCTTCATTCT-MGB

2.根据权利要求1所述的一种检测PCM1-JAK2融合基因的引物探针组合，其特征在于，所述检测PCM1-JAK2融合基因的引物探针组合中各探针的3’末端均标记MGB，5’末端标记FAM、JOE或HEX。

3.根据权利要求2所述的一种检测PCM1-JAK2融合基因的引物探针组合，其特征在于，所述PCM1-JAK2融合基因选自PCM1-26/AK2-9、PCM1-28/JAK2-9、PCM1-30/JAK2-9、PCM1-36/JAK2-9、PCM1-29/JAK2-11、PCM1-36/JAK2-11或PCM1-23/JAK2-12。

4.根据权利要求3所述的一种检测PCM1-JAK2融合基因的引物探针组合，其特征在于，还包括扩增作为内参的管家基因Abl的引物和探针，其核苷酸序列如下：

Abl-F：TGGAGATAACACTCTAAGCATAACTAAAGGT

Abl-R：GATGTAGTTGCTTGGGACCCA

Abl-Probe：FAM-CCATTTTTGGTTTGGGCTTCACACCATT-TAM。

5.一种检测PCM1-JAK2融合基因的试剂盒，所述试剂盒包括检测体系PCR反应液，其特征在于，所述检测体系PCR反应液包括权利要求1所述的引物探针组合A1、检引物探针组合A2；

所述检测体系PCR反应液还包括基因表达预混液、内参基因Abl的引物和探针。

6.根据权利要求5所述的一种检测PCM1-JAK2融合基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括淋巴细胞分离液。