[发明专利]广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽及其应用

说明书

本发明公开了广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽及其应用，属于生物技术领域。本发明活性肽的氨基酸序列为VLSGA或VISGA。本发明对VLSGA或VISGA进行化学合成与活性评价，它们均表现出良好的抗氧化与ACE抑制活性。通过分子对接探究肽的抗氧化机制，我们发现2种肽均能与两种受体蛋白进行有效对接，且它们与Keap1蛋白的结合效果比CD38蛋白更加明显。本发明活性肽是兼具抗氧化和降血压功能性食品配料或药物的理想原料来源，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽及其应用。

背景技术

广东糯米酒是黄酒的一个分支，又称客家黄酒或客家娘酒。根据民间长期饮酒保健的实例和已有的研究表明，广东糯米酒具有减肥、抗衰老、降血压、降胆固醇等功效。这可能与酒中丰富的维生素、活性肽和微量元素有关。但到目前为止，对广东糯米酒的具体物质组成和具体作用还没有进行系统深入的研究。

自由基是机体新陈代谢中产生的具有高度氧化活性的中间产物。它们的共同特点是都含有不成对的电子，这些电子会使活性氧自由基(ROS)产生不稳定性。当机体处于正常的生理状态时，适量自由基能够参与细胞内信号级联，抵御病原体的入侵。然而，过量的自由基不仅会产生毒害作用，还会导致细胞氧化应激，增加人类患糖尿病、心血管疾病、癌症的风险。通过口服抗氧化剂来清除机体内过剩的自由基是目前广泛使用的一种方法，但目前的研究表明，BHT、BHA等人工合成的抗氧化剂存在一定程度的食品安全问题，可对人体器官造成损害。因此，安全性高、容易获得且具有良好抗氧化活性的食源性抗氧化剂已成为当前的研究热点。有研究者利用花粉提取抗氧化肽，经分离纯化后得到具有良好的抗氧化活性的肽；也有人从鲣鱼骨胶原蛋白中鉴定出的抗氧化肽。

高血压是一种常见的慢性疾病，以血管舒张不足为特征，是引起脑血管和心血管疾病的主要因素。高血压目前已成为影响全球死亡率的主要因素，有超过20％的成年人患有高血压。人体的血压是由肾素-血管紧张素系统(RAS)调节的，血管紧张素转换酶(ACE)是其中的关键因素。ACE能够将血管紧张素I转化为血管紧张素II，引起血管收缩，导致血压升高。因此，抑制ACE活性是降低血压的有效途径，ACE抑制剂也成为当下应用最广泛的降血压药物。目前已有研究表明，化学合成的降血压药物有许多副作用，它们不仅降低了患者的耐受性，而且增加了医疗成本。由于食源性肽副作用少且容易获得，还具有不俗于化学合成药物的ACE抑制活性，因此它们成为降血压药物的理想替代品或补充物。

近年来，许多研究者从不同食物来源的蛋白质中提取具有抗氧化或ACE抑制活性的多肽，并且发现一些抗氧化活性强的肽段同时也具有良好的ACE抑制活性。如从小麦胚芽蛋白的KELPPSDADW和SGGSYADELVSTAK，从斜生栅藻提取出的WYGPDRPKFL，从副渔获物提取出来的NGVAA以及从郫县豆瓣酱中提取出来的RGLSK和TPCPPQ。

发明内容

为解决相关问题，本发明的首要目的在于提供广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽。

本发明的另一目的在于提供上述广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽的应用。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

广东糯米酒抗氧化和ACE抑制活性肽，其氨基酸序列为VLSGA(Val-Leu-Ser-Gly-Ala)或VISGA(Val-Ile-Ser-Gly-Ala)。

所述的活性肽的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：对陈酿5年广东糯米酒进行超滤，得到广东糯米酒3KDa组分；

步骤2：利用制备型RT-HPLC系统和C18自组装柱对广东糯米酒3KDa组分进行多级逐级分离纯化后，利用HPLC-MS/MS进一步鉴定分析，即得到所述活性肽。