[发明专利]一种传染性法氏囊病病毒重组VP2蛋白及其在疫苗中的用途

权利要求书

1.一种传染性法氏囊病病毒重组VP2蛋白，其特征在于，它的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。

2.权利要求1所述重组VP2蛋白在制备传染性法氏囊病病毒疫苗中的应用。

3.一种编码传染性法氏囊病病毒重组VP2蛋白的基因，其特征在于，它的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.一种重组载体，其特征在于，它包括SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

5.一种重组病毒，其特征在于，它包括SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，优选地，所述重组病毒是杆状病毒。

6.权利要求3所述的基因、权利要求4所述的重组载体和/或权利要求5所述的重组病毒在制备传染性法氏囊病疫苗中的用途。

7.一种传染性法氏囊病病毒疫苗，其特征在于，它含有传染性法氏囊病病毒重组VP2蛋白抗原，所述传染性法氏囊病病毒重组VP2蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示。

8.如权利要求7所述的疫苗，其特征在于，它还含有佐剂；优选地，所述佐剂为白油司本佐剂。

9.如权利要求7所述的疫苗，其特征在于，它还含有灭活的重组病毒，所述重组病毒包括SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；优选地，所述重组病毒是重组杆状病毒。

10.权利要求9所述疫苗的制备方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)重组病毒接种HighFive细胞，于第4～5日收获上清，加二乙烯亚胺在30～37℃灭活病毒24～96小时，再加入硫代硫酸钠终止灭活，加表面活性剂混匀得到水相；

(2)佐剂灭菌，作为油相；

(3)向油相中加入水相的同时用乳化仪乳化，加入完毕后继续乳化至形成乳化剂，即得；

优选地，步骤(1)所述重组病毒接种HighFive细胞MOI为0.1～1，于第5日收获上清；所述二乙烯亚胺浓度为0.2％w/w，所述硫代硫酸钠浓度为0.02％w/w；所述表面活性剂是吐温-80或吐温-85，所述灭活病毒是32℃灭活96小时；

和/或步骤(2)所述佐剂是白油司本佐剂，白油和司本的质量比为94:6；

和/或步骤(3)所述油相和水相的体积比为2:1；加入水相的同时用乳化仪乳化时间为1min，转速12000r/min；加入完毕后继续乳化的时间为5min；转速18000r/min。