[发明专利]一种驼鹿源特征多肽及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鉴别驼鹿的特征多肽及其应用。本发明提供的特征多肽具体为：肽段1如SEQ ID No.1所示：EFTPELQADYQK。本发明提供的特征多肽针对驼鹿具有优异的专属性和稳定性，特异性强，可用于驼鹿及其衍生产品鹿茸、鹿角药材及饮片、鹿皮、鹿血、鹿鞭、鹿筋的掺伪驼鹿或伪品鉴别，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鉴别驼鹿的特征多肽及其应用。

背景技术

驼鹿（moose）是世界上最大的鹿科动物。鹿科动物具有很高的经济价值，其衍生产品为鹿茸、鹿角、鹿皮、鹿鞭、鹿肉、鹿血、鹿筋等。但市场上产品鱼龙混杂，常有挂羊头卖狗肉者，使用驼鹿产品伪造梅花鹿或马鹿进行售卖。尤其因驼鹿为世界上体型最大的鹿，产量大易取得，相比于资源紧张的梅花鹿茸及马鹿茸，成本低廉。而鹿皮、鹿鞭、鹿肉、鹿血、鹿筋等由于外观相似，主要成分也几乎相同，现有的鉴别方法无法分辨种属。

发明内容

针对现有技术中存在的技术空白，本发明提供了一种鉴别驼鹿源的特征多肽。

本发明还提供了上述特征多肽在鉴别驼鹿种属鉴别中的应用。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种鉴别驼鹿鹿源的特征多肽，所述特征多肽具体为：肽段1如SEQID No.1所示：EFTPELQADYQK。

本发明所发现的特征多肽存在于驼鹿血β珠蛋白中。

进一步的，所述SEQ ID No.1肽段1的质荷比为734.85（z=2）。

本发明还提供了一种用于鉴别驼鹿源的试剂盒，所述试剂盒中包含权利要求1所述的特征多肽。

本发明还提供了一种利用上述特征多肽鉴别驼鹿源的方法，包括以下步骤：

（1）对待测样品进行前处理，得待检测溶液；

（2）将待检测溶液通过液相-三重四级杆质谱法进行检测，分析对比待检测溶液中的质谱结果同肽段1的质谱图，当质谱图中出现肽段1的质谱图时，可判断待测样品为驼鹿或掺伪驼鹿。

进一步的，所述待测样品的前处理具体过程为：样品粉碎，称取样品50mg，加入10ml变性缓冲液，和1ml DTT溶液，摇匀，置80℃处理过夜，取出放冷至室温，离心，量取上清液500μL，加入100μL IAA溶液，避光反应30min，混匀，离心；对样品溶液脱盐后，量取上清液100μL，加入900μL碳酸氢铵溶液（1%）和10μL牛胰蛋白酶溶液，37℃酶解4h，取出放冷至室温，离心，取上清液，即得。

上述变性缓冲液具体制备过程为：称取573.1g 盐酸胍，121.1g 三羟甲基氨基甲烷，0.734g乙二胺四乙酸，加水溶解，加浓盐酸调pH至8.0，加水稀释至1L，摇匀，即得；所述DTT溶液的浓度为2.5M；所述IAA溶液的浓度为2M。

进一步的，所述牛胰蛋白酶溶液的具体制备过程为：液称取牛胰蛋白酶适量，用乙酸溶液溶解，制成浓度为10mg/ml的溶液，临用现配；所述乙酸溶液的浓度为2%。

本发明所使用的液相-三重四级杆质谱法中，液相条件为：色谱柱为ACQUITY UPLC® BEH C18 (2.1×50mm，1.7μm)，柱温43℃，流速0.3mL/min，流动相A为0.1%甲酸溶液，B为0.1%甲酸乙腈溶液，进行梯度洗脱。

上述梯度洗脱的条件为：0～9min,3%B→7.5%B；9～13min, 7.5%B→25%B；13～14min,25%B→90%B；14～17min, 90%B；17～17.5min, 10%B -97%B；17.5～21min,97%B，进样量为5μL。