[发明专利]一种高生育酚含量微藻的培育方法和筛选方法

权利要求书

1.一种高生育酚含量微藻的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：将微藻置于培养基中，避光培养，其中微藻为浐灞湿地公园的人工湖生长的栅藻或新疆博斯腾湖生长的小球藻。

2.如权利要求1所述的一种高生育酚含量微藻的培育方法，其特征在于，所述培养基为BG-11培养基，所述BG-11培养基中Na₂CO₃的添加量为0，所述BG-11培养基还包括有碳源，所述碳源为葡萄糖、工业甘油和工业苹果酸中的一种或多种。

3.如权利要求2所述的一种高生育酚含量微藻的培育方法，其特征在于，所述碳源由葡萄糖和工业苹果酸按质量比为1：1混合而成。

4.如权利要求2或3所述的一种高生育酚含量微藻的培育方法，其特征在于，所述碳源的浓度为15-25g/L。

5.如权利要求1所述的一种高生育酚含量微藻的培育方法，其特征在于，避光培养条件为在温度27℃±2℃、转速100-150r/min的摇床中培养。

6.一种高生育酚含量微藻的筛选方法，其特征在于，用于筛选如权利要求1-5任一所述的一种高生育酚含量微藻的培育方法中的微藻，其特征在于，包括以下步骤：

S1、在不同水域进行水样采集，随后进行藻株的分离纯化；

S2、检测水样中的生育酚含量，进行高生育酚含量藻株的初筛；

S3、测定初筛后样品的生物量和油脂含量，随后再对油脂含量高的微藻进行生育酚含量测定，进行高生育酚含量藻株的复筛；

S4、对复筛后获得的藻株进行18SrRNA基因扩增及序列分析鉴定。

7.如权利要求6所述的一种高生育酚含量微藻的筛选方法，其特征在于，在步骤S2和S3中，生育酚含量采用实时荧光定量PCR检测生育酚合成途径中的关键基因表达量。

8.如权利要求7所述的一种高生育酚含量微藻的筛选方法，其特征在于，生育酚合成途径中的关键基因包括HPPD、GGH、MPBQMT、TC和γ-TMT中的一种或多种。

9.如权利要求6所述的一种高生育酚含量微藻的筛选方法，其特征在于，在S1中，将藻株采用平板划线法进行分离纯化，采用BG-11培养基培养，所述BG-11培养基中Na₂CO₃的添加量为0，所述BG-11培养基还包括20g/L的葡萄糖。

10.如权利要求6所述的一种高生育酚含量微藻的筛选方法，其特征在于，在S2中还包括预先对不同取样地的混合水样进行生育酚含量测定，以筛选取样地；在S3中，还包括采用预先采用尼罗红染色法检测荧光强度以判断油脂含量高低。