[发明专利]SLC35E1基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用有效
| 申请号： | 202210168465.2 | 申请日： | 2022-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN114410691B | 公开（公告）日： | 2022-09-30 |
| 发明（设计）人： | 王晓华;颜韵灵;郑宝庆;欧敏;林秀球 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院;广东省皮肤性病防治中心;中国麻风防治研究中心） |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89;C12N15/12;A01K67/027;A61K49/00 |
| 代理公司： | 广州帮专高智知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 44674 | 代理人： | 颜德昊 |
| 地址： | 510000*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | slc35e1 基因 小鼠 动物 模型 构建 方法 应用 | ||
1.SLC35E1基因敲除小鼠动物模型的构建方法，其特征在于，基于CRISPR/Cas9基因敲除技术构建，包括以下步骤：
(1)根据SLC35E1基因序列确定SLC35E1小鼠待敲除基因的两对特异性靶点gRNA1和gRNA2、gRNA3和gRNA4，并与Cas9核酸酶体外转录成mRNA，其中：
SLC35E1基因的GenBank编码为NM_177766.3；
所述gRNA1的靶点序列如SEQ ID NO:1所示，所述gRNA2的靶点序列如SEQ ID NO:2所示，所述gRNA3的靶点序列如SEQ ID NO:3所示，所述gRNA4的靶点序列如SEQ ID NO:4所示；
(2)将两对特异性靶点gRNA1和gRNA2、gRNA3和gRNA4和mRNA一起显微注射入小鼠受精卵内，显微注射后的受精卵移植至代孕母鼠输卵管内；
(3)显微注射后的受精卵移植至代孕母鼠输卵管内产出小鼠，为F0代小鼠；提取F0代小鼠尾部DNA，PCR扩增并将产物测序，阳性小鼠与野生型异性小鼠交配获得F1代阳性杂合子小鼠，F1代阳性杂合子小鼠杂交获得F2代阳性纯合子小鼠，经基因型鉴定：
若为一个680bp的条带，为阳性纯合子；若为两个990bp和680bp的条带，为阳性杂合子；若为一个990bp的条带，为野生型对照，得到稳定遗传的SLC35E1基因敲除小鼠动物模型。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心），未经南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心）许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210168465.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种智能冷却装置
- 下一篇：一种抗病毒口罩及其生产工艺
