[发明专利]一种实现多模态治疗的智能金纳米粒子的制备方法与应用

说明书

本发明公开一种实现多模态治疗的智能金纳米粒子的制备方法与应用，向金纳米粒子溶液中加入DNA1溶液，再加入PBS溶液和SDS溶液，进行盐化处理，得到盐化溶液，清洗后，得到SNA1；向金纳米粒子溶液中加入DOX‑DNA2溶液，再加入PBS溶液和SDS溶液，进行盐化处理，得到盐化溶液，清洗后，得到SNA2/_DOX；将SNA1和SNA2/_DOX混合，得到实现多模态治疗的智能金纳米粒子。本发明制备的智能金纳米粒子具有高度的肿瘤微环境选择性，可用于抗肿瘤药物的制备中，对健康细胞和组织无杀伤作用，可实现精准治疗，并延长治疗有效期，同时实现包含基因治疗、光热治疗和化学治疗的高效协同治疗。

技术领域

本发明涉及纳米材料技术与生物医用材料领域，具体涉及一种实现多模态治疗的智能金纳米粒子的制备方法与应用。

背景技术

MicroRNAs (miRNAs)是一系列含约22个碱基的非编码RNA，在各种细胞进程中调控基因表达和下游蛋白，其种类与含量的变化与癌症的产生和发展密切相关。据报道，一些特定的miRNA（如miR-21和miR-155）在许多类型的肿瘤细胞中特异性高表达，对肿瘤细胞的增殖、分化和迁移等过程起到重要作用。因此采用反义寡核苷酸抑制这些致癌miRNA的表达是一种有效的肿瘤抑制方法。然而单独的核酸链段存在在体内易降解，难以克服细胞膜屏障等问题，使得其在体内的递送成为目前基于miRNA干扰技术的新型药物临床应用的最大挑战。

球形核酸是一种在纳米材料表面连接众多核酸链的新型纳米材料。与单一的核酸链段相比，球形核酸可直接穿透细胞膜实现有效的细胞内递送，同时其具有强大的抗核酸酶水解性能，有望与反义寡核苷酸结合实现致癌miRNA的抑制。然而，当反义寡核苷酸修饰的纳米粒子用于肿瘤治疗时，由于肾脏/肝脏对纳米粒子的非特异性摄取以及肿瘤细胞对纳米粒子的外排作用使得它们在肿瘤内的滞留量有限、滞留时间短，导致基于反义寡核苷酸基因的疗法无法满足临床应用的需求。

为提高疗效，有报道提出通过纳米复合材料将抑制致癌miRNA表达技术与化疗或光热治疗相结合的策略。然而，这些疗法的作用机理不同，在发挥作用时存在一定的时间和空间差异，无法实现协同抗肿瘤效应。此外，传统光热剂在肿瘤细胞和肿瘤组织周围的健康细胞中具有无差别的光热效应，在进行光热治疗时会产生明显副作用。因此，需要开发一种新型智能纳米材料。

发明内容

针对现有技术中的问题，本发明的目的是提供一种简单、易操作的实现多模态治疗的智能金纳米粒子的制备方法与应用。该方法制备的智能金纳米粒子，在利用肿瘤特异基因微环境触发光热治疗、化疗和长期胞内滞留功能的同时对其相应促瘤基因进行调控，同步实现包括选择性光热治疗、精准化疗及基因治疗的多模态治疗，显著提高肿瘤杀灭效率，且不对人体其他组织和肿瘤组织周围健康细胞产生副作用。并且智能金纳米粒子稳定性佳、易于储存，适用于大规模生产和临床应用。

一种实现多模态治疗的智能金纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

向金纳米粒子溶液中加入DNA1溶液，混匀后再加入PBS溶液和SDS溶液进行混匀，静置进行盐化处理，得到盐化溶液，清洗后，得到SNA1；

向金纳米粒子溶液中加入DOX-DNA2溶液，混匀后再加入PBS溶液和SDS溶液进行混匀，静置进行盐化处理，得到盐化溶液，清洗后，得到SNA2/_DOX；

将SNA1和SNA2/_DOX混合，得到实现多模态治疗的智能金纳米粒子。

进一步的，所述的金纳米粒子溶液中金纳米粒子的浓度为0.3nmol/L-3nmol/L。

进一步的，DNA1与DOX-DNA2的总的物质的量与金纳米粒子的摩尔比为（50-300）：1。

进一步的，盐化处理的时间为48h-96h；盐化溶液中NaCl浓度为0.1mol/L-0.5mol/L。