[发明专利]检测52型和58型HPV的LAMP引物组合、反应体系和方法

权利要求书

1.一种LAMP检测引物组，包括HPV52的引物组和/或HPV58的引物组；

所述HPV52的引物组的核酸序列如下所示：

外引物：

F3：CACTGTACAAAGCAGTG(SEQ ID NO.1)；

B3：AATGTATGTCATAACATCAGC(SEQ ID NO.2)；

内引物：

FIP：TATTGTGGCCCTGCGCACGTTTTTTCTATGGTAACCTCAGAATC(SEQ ID NO.3)；

BIP：CACTCGTAGCACTAACATGACTTTTTCGCCATGACGAAGGTATTCC(SEQ ID NO.4)；

环引物：

LF：CTGAGGTTAAAAAGGAAAGCA(SEQ ID NO.5)；

所述HPV58的引物组的核酸序列如下所示：

外引物：

F3：GACGTGAGCAGATGTTTG(SEQ ID NO.6)；

B3：CATTGTTATGACCTTGTG(SEQ ID NO.7)；

内引物：

FIP：GATAACTGCAGTATTACCGGACCTTTTTAGGGCTGGAAAACTTG(SEQ ID NO.8)；

BIP：CCAACTCCTAGTGGCTCTATAGTTTTCGCTGTAGCCAATAAG(SEQ ID NO.9)；

环引物：

LF：CTCAGAATCACAATTATTTAATAAGC(SEQ ID NO.10)。

2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述HPV52的引物组和HPV58的引物组中外引物、内引物、环引物的摩尔比为(1～2)：(1～2)：1。

3.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的LAMP检测引物组。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含Buffer、DNA聚合酶、指示剂。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述Buffer包含：100～600mM Tris-ClpH8.6～9.0、60～120mM KCl、70～90mM MgSO₄、90～110mM(NH₄)₂SO₄、0.9～1.1％Tween20、7～9M甜菜碱、12～52mM dNTPs。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶为Bst DNA聚合酶；优选地，所述DNA聚合酶的浓度为0.1-0.6U/μl。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述指示剂为荧光染料；所述荧光染料优选为SYBR Green。

8.权利要求1～2任一项所述引物组或权利要求3～7任一项所述试剂盒在(I)或(II)中的应用：

(I)非诊断目的地检测HPV52和/或HPV58；

(II)制备检测HPV52和/或HPV58的产品。

9.一种检测HPV52和/或HPV58的方法，包含以下步骤：

S1：提取待测样品的DNA；

S2：使用权利要求1～2任一项所述引物组或权利要求3～7任一项所述的试剂盒扩增样品DNA；

S3：根据指示剂的指示情况判断结果；

该方法不用于疾病的诊断。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述扩增条件为：55℃～65℃反应10～30min。