[发明专利]一种金黄色葡萄球菌组成型启动子、表达载体及其构建方法、重组菌株及应用有效
| 申请号： | 202210006664.3 | 申请日： | 2022-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN114480387B | 公开（公告）日： | 2023-08-25 |
| 发明（设计）人： | 刘强 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/74;C12N1/21;A61K48/00;A61P31/04;C12R1/445 |
| 代理公司： | 成都科海专利事务有限责任公司 51202 | 代理人： | 刘业芳 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 金黄色 葡萄球菌 组成 启动子 表达 载体 及其 构建 方法 重组 菌株 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种金黄色葡萄球菌组成型启动子，其特征在于，所述组成型启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种包含权利要求1所述的金黄色葡萄球菌组成型启动子的表达载体。
3.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体是在大肠杆菌-金黄色葡萄球菌穿梭质粒插入权利要求1所述的组成型启动子构建而成。
4.一种如权利要求2所述的表达载体的构建方法，其特征在于，包括：
在大肠杆菌-金黄色葡萄球菌穿梭载体质粒pBUS1-Pcap-HC的BglII位点插入氯霉素抗性基因，得到携带氯霉素抗性基因的pBUS1_Pcap_HC_cat质粒；
利用限制性内切酶KpnI和NdeI切掉pBUS1_Pcap_HC_cat质粒中的Pcap启动子，并替换为权利要求1所述的组成型启动子，得到携带组成型启动子的基因表达载体。
5.一种包括权利要求2所述的表达载体的重组菌株。
6.根据权利要求5所述的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株是在表达载体的NdeI和XhoI位点插入绿色荧光蛋白基因GFP，以形成由权利要求1所述的组成型启动子驱动GFP基因表达的载体质粒；并将所形成的载体质粒转入MRSA的S.aureusUSA300_FPR3757菌株中培养形成。
7.权利要求1所述的金黄色葡萄球菌组成型启动子在制备抗金黄色葡萄球菌感染的药物中的应用。
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