[发明专利]工程化抗HER2双特异性蛋白

权利要求书

1.一种蛋白质，其包含：

(a)第一Fc多肽，其在N端融合至Fab的Fd部分；

(b)第二Fc多肽，其在N端融合至单链可变片段(scFv)，其中所述第一Fc多肽和第二Fc多肽形成Fc二聚体；以及

(c)轻链多肽，其与(a)中所述的Fd部分配对以形成Fab，

其中所述Fab结合至人HER2的亚结构域II并且所述scFv结合至人HER2的亚结构域IV，或者其中所述Fab结合至人HER2的亚结构域IV并且所述scFv结合至人HER2的亚结构域II。

2.如权利要求1所述的蛋白质，其中所述Fab结合至人HER2的亚结构域II并且所述scFv结合至人HER2的亚结构域IV。

3.如权利要求1所述的蛋白质，其中所述Fab结合至人HER2的亚结构域IV并且所述scFv结合至人HER2的亚结构域II。

4.如权利要求1至3中任一项所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽通过第一接头融合至所述scFv。

5.如权利要求4所述的蛋白质，其中所述第一接头的长度为1至20个氨基酸。

6.如权利要求4或5所述的蛋白质，其中所述第一接头包含序列GGGGSGGGGS(SEQ IDNO:118)。

7.如权利要求1至6中任一项所述的蛋白质，其中所述scFv包含通过第二接头连接的V_L区和V_H区。

8.如权利要求7所述的蛋白质，其中所述第二接头的长度为1至20个氨基酸。

9.如权利要求7或8所述的蛋白质，其中所述第二接头包含以下序列中的任一种：GGSGGGSGGGSGGGSGGGSG(SEQ ID NO:116；(GGSG)₅)、GGGGS(SEQ ID NO:117；G₄S)、GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:118；(G₄S)₂)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:119；(G₄S)₃)、GGGGSGGGGSGGGG(SEQ ID NO:120；(G₄S)₂-G₄)、GGGGSGGGGSGG(SEQ ID NO:121)、GGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:122)和GGGGGSGGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:123)。

10.如权利要求1至9中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和/或所述第二Fc多肽特异性结合至转铁蛋白受体。

11.如权利要求1至10中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和所述第二Fc多肽各自包含促进异二聚化的修饰。

12.如权利要求11所述的蛋白质，其中根据EU编号，所述第一Fc多肽包含T366W取代，并且所述第二Fc多肽包含T366S、L368A和Y407V取代。

13.如权利要求11所述的蛋白质，其中根据EU编号，所述第一Fc多肽包含T366S、L368A和Y407V取代，并且所述第二Fc多肽包含T366W取代。

14.如权利要求1至13中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和/或所述第二Fc多肽独立地包含降低效应子功能的修饰。

15.如权利要求14所述的蛋白质，其中根据EU编号，所述降低效应子功能的修饰是L234A和L235A取代。