[发明专利]肺癌的血小板分子标记物、试剂盒和检测方法在审
| 申请号: | 202111634283.1 | 申请日: | 2021-12-29 |
| 公开(公告)号: | CN114438204A | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
| 发明(设计)人: | 祖瑞铃;罗怀超;文霄瑕;李玉苹;张开炯;刘畅 | 申请(专利权)人: | 四川省肿瘤医院 |
| 主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/12;C12N15/11 |
| 代理公司: | 成都环泰专利代理事务所(特殊普通合伙) 51242 | 代理人: | 李辉;李斌 |
| 地址: | 610000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 肺癌 血小板 分子 标记 试剂盒 检测 方法 | ||
1.一种肺癌的血小板分子标记物在制备肺癌检测试剂盒中的应用,其特征在于,所述分子标记物的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种肺癌检测试剂盒,其特征在于,包括所述血小板分子标记物的上游引物和下游引物;
FLNA-F的碱基序列(5'to3'):TCATTCGTGCCCAAGGAGAC
FLNA-R的碱基序列(5'to3'):CTGACCAGAGACCCGAACAC。
3.根据权利要求2所述的肺癌检测试剂盒,其特征在于,试剂盒还包括GAPDH内参基因引物;
GAPDH-F的碱基序列(5'to3'):GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT
GAPDH-R的碱基序列(5'to3'):GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG。
4.根据权利要求2所述肺癌检测试剂盒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取待测血小板样本和正常组织的总RNA,逆转录合成cDNA;
2)以cDNA为模板,在所述上游引物和下游引物的引导下采用荧光定量PCR进行FLNA基因扩增,另外,对GAPDH内参基因进行扩增,同时检测FLNA基因及GAPDH基因的荧光值及CT值;
3)采用与GAPDH的相对定量法计算所述分子标记物的表达量。
5.根据权利要求4所述肺癌检测试剂盒的检测方法,其特征在于,荧光定量PCR反应条件设置:95℃预变性30s,95℃变性5s,60℃退火30s,共40个循环,收集荧光信号;60-95℃做溶解曲线分析以确定扩增产物的单一性。
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