[发明专利]一种用于捕获Poly A（+）RNA的磁珠、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种用于捕获Poly A(+)RNA的磁珠的制备方法，包括以下步骤：

将羧基磁珠、活化剂和5’端伯氨基修饰的Oligo dT探针在偶联缓冲试剂中混合，在室温下反应16～20小时，得到用于捕获Poly A(+)RNA的磁珠。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述磁珠的外层为聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸缩水甘油酯、琼脂糖或葡聚糖；

所述磁珠的粒径为100nm～150μm。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述磁珠的浓度为5～100mg/mL。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述活化剂为碳二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺的一种或几种；

所述活化剂的浓度为10～100mg/mL。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述5’端伯氨基修饰的Oligo dT探针长度为10～30nt；

所述羧基磁珠质量与5’端伯氨基修饰的Oligo dT探针的物质的量之比为1mg：(0.1～5)nmol。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述偶联缓冲试剂包括吗啉乙磺酸、磷酸盐缓冲液、咪唑或碳酸氢钠；

所述偶联缓冲试剂的pH为4.0～9.0；所述偶联缓冲试剂的浓度为50～100mmol/L。

7.根据权利要求1～6任意一项所述的制备方法，其特征在于，将反应得到的磁珠与封闭液混合，进行封闭反应，然后使用洗涤缓冲液进行洗涤，最后将磁珠置于保存液中进行保存。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述封闭液为乙醇胺、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、牛血清白蛋白和甘氨酸中的一种或几种；

所述封闭液的pH为8.0～8.5，浓度为2～4mol/L。

9.如权利要求1～8任意一项所述的制备方法制备得到的捕获Poly A(+)RNA的磁珠。

10.如权利要求9所述的捕获Poly A(+)RNA的磁珠在捕获Poly A(+)RNA中的应用。